IGF-Ⅱ对阿霉素诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的拮抗及对凋亡抑制蛋白survivin表达的影响

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目的:肝细胞肝癌患者确诊时多已属中晚期,且多伴有肝硬化或门静脉癌栓,而难以行根治性切除,现无法根治性切除的肝癌的治疗仍有赖于化疗或与化疗相关的治疗。目前多数观点认为肝癌属于化疗耐药性疾病,肝癌细胞产生耐药性是化疗失败及肝癌复发的主要原因之一。肿瘤细胞耐药与多方面因素有关,其中肿瘤细胞的凋亡受到抑制是一个重要的方面。Survivin为凋亡抑制蛋白家族的成员之一,是迄今为止发现的最强的凋亡抑制因子;其在肝细胞肝癌中呈高表达,在肝癌的化疗耐药中扮演重要的角色。此外,在肝癌患者的血清及肿瘤组织中,胰岛素样生长因子Ⅱ(insulin-like growth factor Ⅱ,IGF—Ⅱ)的表达较正常时明显增高。研究显示IGF—Ⅱ能够抑制肝癌细胞的自然凋亡,并且也能够拮抗蒽环类抗生素等化疗药物诱导的肝癌细胞凋亡,降低肝癌细胞对化疗的敏感性。那么IGF—Ⅱ的这种抗凋亡作用是否与凋亡抑制蛋白survivin的表达有关呢?本实验重在研究IGF—Ⅱ的存在对阿霉素(adriamycin,ADM)诱导的人肝癌细胞HepG2凋亡的影响及与survivin蛋白表达的关系。 方法: 1.细胞培养及分组:体外培养人肝癌细胞株HepG2,分组如下:①对照组(加入含2%胎牛血清的1640培养液);②ADM组(以含2%胎牛血清的1640培养液将ADM稀释成200ng/ml);③2ng/ml IGF—Ⅱ+200ng/ml ADM组(以含2%胎牛血清的1640培养液将IGF—Ⅱ及ADM稀释成IGF—Ⅱ浓度为2ng/ml、ADM
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