二化螟和县种群Cry1Ab抗性基因的起始频率及田间种群对Cry1A的敏感性调查

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二化螟Chilo suppressalis (Walker)是水稻上一种为害严重的常发性害虫。目前我国对于二化螟的防治主要依靠化学药剂,但化学药剂的长期大量使用常会引起环境污染、害虫抗药性上升等一系列问题。转Bt基因抗虫水稻(Bt水稻)则为防治二化螟提供了一种高效、经济和环保的全新方法。目前,我国已经有两种转crylA6和cry1Ac融合基因的Bt水稻品种获得了农业部颁发的生物安全证书,这预示着Bt水稻有可能会在我国实现商业化种植。在Bt水稻商品化推广之前,检测田间二化螟种群对Bt的抗性等位基因频率,建立不同地理种群对Bt毒素的敏感性基线,可以为今后实施抗性监测预警及制定有效的抗性管理措施提供重要依据。本文通过F2筛选法检测了安徽和县地区的二化螟田间种群对Cry1Ab的抗性等位基因频率,并通过测定长江中下游流域10个地区的二化螟田问种群对Cry1Ab和Cry1Ac的敏感性,建立了敏感毒力基线。本文的研究结果将为我国对二化螟Bt抗性的监测和治理奠定一定基础。1.二化螟和县种群对Cry1Ab抗性等位基因起始频率的检测2011年5月从安徽和县地区的水稻上采集第一代二化螟卵块,把每一个卵块作为一个单雌系单独饲养至第二代后,用Cry1Ab区分剂量对112个单雌系进行F2筛选。结果发现该二化螟田间种群中存在对Cry1Ab的主要抗性等位基因,抗性等位基因频率估计为0.0088,95%的置信限为(0,0083-0.0258)。该抗性等位基因频率值在Bt水稻尚未商业化种植的情况下显得略微偏高,说明田间种群存在对Cry1Ab产生抗性的风险,所以我们应该考虑在Bt水稻商业化种植的同时采用相应的抗性治理措施,以保证Bt水稻的使用寿命。2.二化螟田问种群对Cry1Ab和Cry1Ac的敏感性调查2012年采集了长江中下游流域10个地区的二化螟田间种群并测定了这10个种群对Cry1Ab和Cry1Ac两种毒素的敏感性。结果显示:二化螟田间种群对Cry1Ab的LC50值变化范围在0.071-1.246μg/100μl之间,相差17.5倍;对Cry1Ac的LC50值变化范围在0.057-1.094μg/100μl之间,相差19.2倍。不同地区的二化螟种群对两种毒素的敏感性差异较大(20倍左右),说明二化螟田间种群可能对Cry1Ab和Cry1Ac存在着较高的抗性风险。对Cry1Ab和Cry1Ac间的相关性分析表明,二化螟对Cry1Ab和Cry1Ac的敏感性之间存在显著正相关(r=0.689,p=0.0275),这说明如果二化螟对其中一种毒素的耐受力较高,那么它也有可能会对另一种毒素产生较高的耐受力。
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