西妥昔单抗对胃癌细胞增殖与凋亡的影响

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目的:研究西妥昔单抗对体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:不同浓度西妥昔单抗(12.5、25、50、100ug/ml)作用于对数期生长的胃癌细胞SGC-7901,倒置显微镜下观察细胞生长情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察西妥昔单抗对SGC-7901细胞生长抑制作用;流式细胞术(FCM)检测对细胞周期和细胞凋亡的影响;RT-PCR方法检测Bcl-2、P-27及Caspase-3mRNA的表达水平;免疫组化(SP)法测定细胞内Bcl-2、P-27及Caspase-3蛋白表达变化。结果:(1)MTT比色法显示不同浓度的西妥昔单抗可抑制SGC-7901细胞增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性,试验组与对照组及各试验组之间比较均有统计学意义(P<0.05)。(2)流式细胞术检测胃癌细胞SGC-7901经西妥昔单抗作用48小时后可见细胞周期有明显变化,G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,呈浓度依赖性(P<0.05),细胞凋亡率与西妥昔单抗浓度呈正相关。(3)RT-PCR法和免疫组化(SP)法显示,SGC-7901细胞Caspase-3、P-27 mRNA和蛋白随西妥昔单抗浓度增加而表达增加,Bcl-2mRNA和蛋白随药物浓度增加表达下降(P<0.05)。结论:(1)西妥昔单抗可以抑制体外培养的人胃癌细胞SGC-7901增殖,诱导细胞凋亡。(2)西妥昔单抗对SGC-7901细胞生长抑制和诱导凋亡作用可能与上调Caspase-3、P-27基因转录和蛋白表达,下调Bcl-2基因转录和蛋白表达有关。
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