研究背景及目的目前世界范围内癫痫的患病率在0.5-1.5%,我国癫痫病人约700-800万左右,大约40%癫痫为特发性,其中遗传因素在特发性癫痫病因中起到重要作用,明确遗传学病因,有利于明确诊断及针对性治疗,促进癫痫控制。常染色体显性遗传夜发性额叶癫痫(autosomal dominant nocturnal frontal lobe epilepsy,ADNFLE)可由烟碱乙酰胆碱受体(neuronal nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)α4、β2和α2亚单位编码基因(CHRNA4、CHRNB2、CHRNA2)跨膜区突变所致。ADNFLE与临床中更常见的散发病例夜发性额叶癫痫(nocturnal frontal lobeepilepsy,NFLE)在临床相难于鉴别,并且有报道在散发NFLE患者中发现ADNFLE致病突变CHRNA4-C755T,且为新发突变,并在家系中传递,使NFLE散发病例发展为受累病例更多的ADNFLE家系。结合我国ADNFLE家系罕见、NFLE散发病例多见的实际情况,我们在中国人群NFLE散发病例中筛查nAChR编码基因CHRNA4、CHRNB2和CHRNA2中与ADNFLE相关突变外显子,探讨nAChR相关基因在NFLE发病机制中的作用。方法33名中国NFLE患者,经临床资料、家族史及辅助检查VEEG、MRI等综合诊断,男19名,女14名,平均年龄18.76±7.59岁。外周血白细胞酚氯仿法提取基因组DNA,依据CHRNA4、CHRNB2基因序列及其中ADNFLE相关突变位点,应用软件Primer5.0设计聚合酶链反应(PCR)引物及参考文献选取CHRNA2相关引物,PCR分别扩增CHRNA4、CHRNB2、CHRNA2基因中包含跨膜区1-3和与ADNFLE相关已知突变序列,经双向测序筛查突变,通过测序图阅读、文献检索,确认已知突变、单核苷酸多态性与新型变异。对可疑NFLE致病相关新型变异,应用限制性内切酶(Cac8Ⅰ、MscⅠ)酶切及1%琼脂糖凝胶电泳或12%聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,并以同样方法在100名中国人群健康对照组中筛查新型变异,比较新型变异在病例组及健康对照组的频率,初步确认突变。经突变性质分析、家系传递分析及氨基酸进化保守度分析等遗传学方法比较,探讨突变在NFLE中的作用。结果中国人群NFLE散发病例组在CHRNA4筛查中,于一名发病较早、抗癫痫药物效果较差患者中,发现一种新型杂合错义突变G923A,导致位于nAChR-α4亚单位第三、四跨膜区间第二个细胞内环、接近第三跨膜区处发生R308H突变,即精氨酸替换为组氨酸,在100名中国人群健康对照筛查中,未见这一突变;还发现一种可能的新型多态A1054 G,在200条对照染色体中发现1个这种变异。在CHRNA4筛查中,发现一种已知多态T1125G。NFLE散发病例组在CHRNB2和CHRNA2筛查中,未见突变。结论1.中国人群散发NFLE病例中存在CHRNA4-E5错义突变R308H,可能为NFLE新型遗传学病因。2.CHRNA4-E5非跨膜区编码基因突变可能与NFLE/ADNFLE发病相关。3.CHRNA4为NFLE/ADNFLE相关突变热点,CHRNA2、CHRNB2突变为两者较少见病因。研究背景及目的目前世界范围内癫痫的患病率在0.5-1.5%,我国癫痫病人约700-800万左右,其中30-40%为药物难治性,以切除癫痫源为目的的外科手术是治疗难治性癫痫的有效手段,因而对与癫痫源存在密切联系的脑功能区进行精确定位,以较少手术损伤,已成为癫痫术前评估的必要程序和研究热点。大量研究表明,因准确、可靠、无创的优势,功能磁共振成像(functional magnetic resonance imaging,fMRI)已成为癫痫患者术前语言评估中的一种常规应用技术。还有研究表明,应用fMRI显像中感兴趣区激活情况计算的半球侧化指数(laterality index,LI)及语义任务组块设计对语言优势半球(hemispheric language dominance,HLD)的评价准确性更高、局部LI中额部LI较颞顶区LI更显示与Wada试验一致,及LI受患者癫痫发病年龄、癫痫病程等因素影响。同时,也有研究显示在语义任务fMRI中英语等西语系较汉语更易显示偏侧优势。近来,有研究表明癫痫患者术前fMRI评估语言中LI对左前颞叶切除术(left anterior temporal lobectomy,L-ATL)术后患者命名功能下降有预测作用,而颞顶区LI显示更强的预测效力。由于,采用汉语任务、在中国人群颞叶癫痫患者中应用flVIRI的研究还较为缺乏。因此,本研究中,我们应用fMRI技术评估中国药物难治性颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)患者术前HLD,采用汉语语义任务及额下回、颞顶区总LI为标准判定HLD,并应用语言量表于患者术前术后评估语言功能,探讨fMRI技术在应用汉语语义任务下,于中国颞叶癫痫患者HLD评估中的成像特点、术后语言功能预测作用及LI相关影响因素分析。方法在北京协和医院癫痫中心及神经外科就诊且手术的10名药物难治性非病灶性颞叶癫痫患者中进行了一个前瞻性队列研究。通过病史、临床表现、术前综合评估确诊入组病例。收集患者临床资料。患者于术前测量患者语言功能量表(ABC)、fMRI评估语言优势半球。术后6-9个月随访及测量语言功能量表(ABC)。在fMRI评估中,应用汉语语义任务,以左额下回、左颞顶区及对应右侧脑区为感兴趣区,计算LI-总、额下回LI及颞顶区LI,通过Cohen’skappa检验,比较各局部LI与LI-总一致性。通过X~2检验、Spearman’s参数计算分析LI与年龄、发病年龄、病程、癫痫源侧等相关性。通过患者术前及术后语言功能量表(ABC)评分变化,分析LI对前颞切除术术后命名功能改变的预测作用。结果我们采用汉语语义任务fMRI评估中国药物难治性颞叶癫痫患者术前语言功能,结果表明LI-颞顶(kappa=1)较LI-额(kappa=0.375)更准确地指示HLD;同时,本研究显示癫痫发病年龄(r=0.778,p＜0.01)、患病时间(r=-0.744,p＜0.01)与癫痫患者的LI显著相关,及LI-总对L-ATL组患者术后语言命名功能下降预测与命名定性判定间一致性良好(kappa=0.5)、LI-总与R-ATL组患者术后命名改变显著呈负相关(r=-0.924,P＜0.01)。结论我们的研究首次表明在应用fMRI汉语语义任务评估颞叶癫痫患者术前HLD中,LI-颞顶而不是LI-额与LI-总指示的HLD更相一致;癫痫发病年龄、癫痫病程对形成非典型HLD起作用;fMRI-LI对前颞叶切除术术后命名功能改变具有预测作用。