急性冷暴露对大鼠血脑屏障通透性的影响及木樨草素的防护效应

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寒冷环境可能会对机体产生重大的影响,当机体处于寒冷环境一段时间以后,机体内环境的稳定性、生理和行为等都会发生一系列的改变。寒冷的研究历史很长,目前对于寒冷损伤的研究多集中于寒冷对代谢、循环系统以及皮肤的损伤等方面,而寒冷对中枢神经系统的损伤机制和神经损伤后引起的行为的改变以及防护措施的研究仍然没有得到应有的重视。木樨草素在自然界中分布广泛,可从多种天然药物、蔬菜果实中分离得到,可以保护寒冷环境中的机体。我们可以建立大鼠脑损伤冷暴露模型,并研究急性冷暴露后大鼠血脑屏障通透性的变化以及行为学上的改变,并初步观察黄酮类化合物木樨草素可能的保护效应,以期为阐明寒冷对神经系统损伤的机制研究以及寻找有效的防护措施提供理论依据和实验资料。实验目的对大鼠进行急性冷暴露后建立寒冷脑损伤动物模型,探讨冷暴露对大鼠血脑屏障通透性的影响及其开放后在寒冷所导致的中枢神经损伤中的作用,并探索木樨草素对大脑保护的可能性,初步探讨膳食营养素在这个过程中可能的保护作用,为寒冷损伤的防护提供新的理论依据以及可能的途径实验方法雄性SD大鼠,分笼饲养,正常饮食。实验按体重区组随机分为:对照组:基础饲料喂养,在实验开始置于与冷暴露组相同的实验环境中但不接受冷暴露。冷暴露组:基础饲料喂养,实验开始后大鼠接受冷暴露。低防护组:基础饲料喂养,实验开始每天以10mg/kg浓度的木樨草素进行灌胃,持续14d。中防护组:每天以20mg/kg浓度的木樨草素进行灌胃。高防护组:每天以40mg/kg浓度的木樨草素进行灌胃。冷暴露实验开始,五组大鼠禁食水,除对照组外,其余四组均在-15℃的冰库内冷冻3h以建立大鼠急性冷暴露的动物模型,利用伊文思蓝染色、脑组织含水量法检测血脑屏障的开放程度,并在此基础上进一步探讨木樨草素可能的保护效应。同时应用Morris水迷宫测试大鼠的空间记忆能力,比较大鼠在接受冷刺激前后大脑空间记忆能力有否改变,进而探讨在冷刺激下大脑有否损伤。实验结果1.冷暴露组、各个防护组EB含量均明显高于相同时间的正常组,差异有显著性(p<0.05)。2.冷暴露后其对照组及各个防护组脑含水量高于正常组,差异有显著性(p<0.05)。3.各个防护组EB含量明显低于冷暴露组,差异有显著性(p<0.05),且各个防护组相对于冷暴露组含水量低,差异有显著性(p<0.05)。4.冷暴露后对照组及各个防护组的大鼠空间记忆能力有所改变,记忆力明显下降,差异具有显著性(p<0.05)。实验结论1. EB浓度的增高充分说明在寒冷刺激下,大鼠血脑屏障通透性会开放。2.脑干湿比含量的增加说明在冷冻期血脑屏障就明显增高。3.说明木樨草素对大鼠血脑屏障的通透性具有一定的保护效应。4.急性冷暴露后,大鼠的记忆力有明显的下降趋势。
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