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引言器官移植供、受体之间HLA配型与移植后排斥反应以及移植物存活率相关。而且，免疫排斥反应常常归结于HLA配型的不一致。然而，研究发现，移植失败也会出现在HLA配型一致的亲属活供体器官移植中。这一点提示我们，非HLA类因素也许也参与了移植免疫并可能导致移植失败。后续的一系列研究证实：在器官移植中，非HLA类抗原的确与移植后排斥反应乃至移植失败均存在相关性。MICA是一类非经典的MHC-Ⅰ类样分子，起码包含有77个以上的等位基因。其在主要组织相容性复合体（MHC）的位置与人类白细胞抗原B基因位点呈连锁不平衡状态。与经典的MHC-Ⅰ类分子不同，MICA大量表达于内皮细胞表面，并不与β2微球蛋白结合，这一特点使得其成为细胞免疫和体液免疫反应共同的靶分子。MICA等位基因的多样性在不同种族和人群中的分布也不尽相同。多态性的MICA基因能够诱导移植物抗宿主排斥反应（GVHR）或宿主抗移植物排斥反应（HVGR）的发生。多年来，研究证实了移植受体体内存在MICA抗体的事实，且同种异体之间移植而引发MICA抗体的出现与移植排斥反应有关。事实表明，HLA配型一致的实体器官移植中，受体也常常会经历移植后免疫排斥反应。因此，除外经典的HLA分子，非经典的HLA样分子（如MICA分子）也很可能与同种异体器官移植物的存活及排斥反应具有相关性。研究中经常发现，出现移植物功能障碍及移植排斥反应重的受体体内HLA抗体和MICA抗体含量普遍要高于移植物功能良好、移植排斥反应较轻的受体。目前，临床实体器官移植，包括亲属活供体器官移植都还没有术前常规进行MICA基因配型的做法。因此，我们的研究就是为了探求移植供、受体之间MICA配型情况以及MICA抗体对于临床实体器官移植的影响。目的通过临床样本的收集，进行一系列的体外实验，并辅以临床观察，巩固和深入研究MICA基因及其抗体在免疫排斥反应中的作用。在尽量排除HLA抗原及其抗体对移植物影响的前提下，研究移植供、受体之间MICA等位基因配型与移植后排斥反应的相关性。并通过移植受体体内MICA抗体的检测结果配合供、受体之间MICA配型结果，找到MICA等位基因及其抗体参与临床实体器官移植的直接证据。通过统计学分析，进一步说明MICA基因配型、移植排斥反应以及移植物生存时间三者之间的关系。最后，根据实验结果阐明MICA基因参与移植后免疫排斥的事实，为今后的器官移植结果提供可靠的预测性指标，并为移植前合理的进行供、受体间MICA基因配型奠定一定的理论依据，从而最大可能地避免免疫排斥的发生。方法1.采集1999年至实验期间先后进行的共计20例亲属活供体器官移植全血标本。提取基因组DNA后采用序列特异性引物聚合酶链反应进行检测和凝胶电泳分析，以明确供、受体之间HLA配型关系；2.查阅文献后，选取中国北方汉族人群频率最高的8个MICA基因型，并根据选取结果设计、合成引物。在提取基因组DNA之后亦采用序列特异性引物聚合酶链反应和凝胶电泳进行检测、分析，以明确供、受体样本中MICA基因的匹配情况；3.针对存活的移植受体分别于移植术后2、4、6、8、10、12个月分六次采集血清样本。使用多功能液相芯片分析平台（Luminex）及LABSscreen软件检测所选取样本中的MICA抗体存在。利用分光测色仪（LABScan）检测群体反应性MICA抗体的平均免疫荧光浓度(MFI)，然后以HLA-VisualTM软件进行分析，以明确移植后不同时间段的移植受体体内MICA抗体水平；4.移植后2周至6个月内的所选取受体的移植后病理活检标本由固定病理学专业人员反复镜检并分析。根据国际统一的Banff标准，将移植后活检样本的免疫排斥反应分为不同等级；5.结合选取受体临床基本情况及接受免疫抑制治疗情况，记录移植受体生存状况及生存时间；6.根据得到的移植供、受体之间HLA和MICA配型结果，结合排斥反应病理学分级情以及移植受体的生存状况和MICA抗体检测情况进行观察并行统计学分析。结果1.所有选取的亲属活供体移植供、受体之间的HLA配型均为半相合状态，属于器官移植中很理想的状态；2.所有选取的移植供、受体之间的8个MICA基因型（13个等位基因）配型情况不一致。供、受体之间MICA基因匹配率高的移植受体显示出较轻的移植后排斥反应以及更佳的存活情况，反之则反；3.移植受体内MICA抗体的检测情况与供、受体MICA基因匹配率及移植后排斥反应情况大体一致。移植后出现排斥反应的受体中MICA抗体为阳性，且病理排斥反应较重的受体中MICA抗体出现的几率及强度高于病理排斥反应较轻的移植受体，即排斥反应越重，MICA抗体的强度越高。同时，根据平均荧光浓度的检测结果，我们认为，群体反应性MICA抗体对于移植术后急、性慢性反应都具有影响；4.器官移植的供、受体之间MICA基因匹配情况与移植后排斥反应、生存率存在相关性。因此，在移植前如果除外常规进行的HLA配型还进行MICA基因的配型，那么就可以更好的预测移植结果，甚至可以指导移植供体的选择，直接为提高移植物存活提供帮助。