论文部分内容阅读
脂质体是药物传递研究领域最好的药物载体类型之一,然而,控制被包裹的药物在特定的空间和时间上从脂质体中释放出来依然是一个亟待解决的难题。光热消融(PTA)是一种采用近红外(NIR)激光产热来杀伤肿瘤细胞的技术;该技术在肿瘤治疗上展现了良好的临床应用前景。但是,仅仅通过PTA治疗很难彻底地根治肿瘤,因为热量分布的不均匀导致肿瘤的部分区域的热量低于杀伤热剂量。在本研究中,我们制备了一种新型的热敏脂质体,又称光敏脂质体。该载药脂质体含有中空金纳米颗粒(hollow gold nanospheres, HAuNS)和阿霉素(doxorubicin,DOX)。中空金纳米颗粒(hollow gold nanospheres, HAuNS),其粒径为35.6±1.7nm,多分散系数PI为0.003。近红外下具备良好的表面等离子共振(surface plasmon resonance)光学特性,可以吸收近红外光并产生热量。透射电子显微镜结果已经验证,HAuNS经疏水性修饰后,可以粘附在热敏脂质膜上。在NIR激光照射条件下,光敏脂质体展现了光热效应,还可以控制药物释放。我们的实验结果表明,NIR激光照射条件下,DOX从光敏脂质体(DOX&HAuNS-TSL)中快速且持续地释放出来。在体外的释放研究中,NIR照射下,24h内,DOX从DOX&HAuNS-TSL中的累积释放量提高了近40%;而无NIR照射下,24h内,DOX从DOX&HAuNS-TSL中的累积释放量不超过6%。主要是由于疏水性的HAuNS粘附在脂质膜上,吸光产热,升高的温度达到脂质体的相转变温度进而提高了脂质膜的通透性。我们的数据也表明,较之单一的DOX&HAuNS-TSL,单一的DOX-TSL,或者HAuNS-TSL结合NIR激光照射;采用DOX&HAuNS-TSL结合NIR激光照射,呈现更为显著的细胞毒性。主要由以下三方面作用造成:1)光热消融(PTA)效应,2)DOX从DOX&HAuNS-TSL中的触发导致细胞内的药物浓度增加,3)光热效应和DOX药物作用的联合作用。而且,体内抗肿瘤研究结果表明,由DOX&HAuNS-TSL结合NIR激光照射介导的光热和化学治疗联合效应,较之由HAuNS-TSL结合NIR激光照射介导的光热消融(PTA)效应,展现更显著彻底的抗肿瘤效果。揭示在肿瘤的PTA临床应用治疗中,本研究的DOX&HAuNS-TSL结合NIR激光照射介导的联合效应具备重要的参考价值和方向性意义。在光敏脂质体基础上,引入Her2抗体,通过化学修饰对其进行表面修饰与嫁接,制备Her2免疫光敏脂质体,可以特异性地被BT474及SKOV3所摄取。在BT474/A549或SKOV3/A549细胞共孵育体系中,DOX&HAuNS-Her2-TSL能够特异性地主动靶向至BT474或者SKOV3细胞;并且导致SKOV3/A549体系中,SKOV3的相对存活率从47.4%下降至22.4%;BT474/A549体系中,BT474的相对存活率从从54.3%降至29.1%。在荷SKOV3/A549双肿模型动物体内分布研究中,DOX&HAuNS-TSL更多地靶向至SKOV3实体瘤。在抗肿瘤药效学研究中,我们数据表明,照射NIR条件下,较之DOX&HAuNS-TSL组,DOX&HAuNS-Her2-TSL组展现更为优良的抗肿瘤效果。主要是它能够主动靶向至肿瘤部位,进一步扩大了光敏脂质体的光热和化学治疗联合抗肿瘤的效应。