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目的：转化生长因子β(Transforming Growth Factorβ，TGF-β)是-族在细胞增殖、分化过程中起基本调节作用的激素样活性多肽，包括TGF-β1～5五种异构体。TGF-β通过与细胞膜上的转化生长因子β受体(Transforming Growth Factor β receptors，TβR)结合，发挥其细胞信号传递作用，使细胞停止增殖，阻断细胞于G1期，是-类重要的生长抑制因子。调控细胞增殖、分化信息的传递通路中某-环节的异常均可以引起细胞生长失控，最终导致肿瘤的形成。TβR是一种新的抑癌基因，肿瘤细胞中最常见的是TBR-II表达异常，主要表现为缺失和功能失活；它在细胞表面发挥作用，其表达异常造成的直接后果是扼制了TGF-β1的生长抑制作用，使肿瘤细胞增殖失控。本实验采用免疫组织化学技术和原位杂交技术，分析TGF-β1mRN及TβR-Ⅱ在原发断癌中的表达及其与肿瘤预后的关系，探讨它们在原发性肝癌诊断及预后评价的应用价值。
方法：研究对象 32例原发性肝癌（primary hepaticcarcinoma，PHC)患者[其中22例肝细胞型肝癌(hepaticellular carcinoma，HCC)、6例胆管细胞型肝癌(cholangiocarcinoma，CC)和4例混和细胞型肝癌(combined hepatocholangiocarci-noma，CHCC)]手术切除的癌及癌旁组织标本。选择同期15例肝硬化(hepatic cirrhosis,HC)患者，术中肝组织活检标本和10例外伤性肝破裂患者手术切除的肝组织标本作对照。技术方法采用改良SP免疫组化检测技术，检测肝癌及癌旁组织、肝良性病变组织中的TβR-II蛋白的表达。采用原位杂交技术，检测肝癌及癌旁组织、肝脏良性病变组织中的TGF-β1 mRNA的表达。统计学处理应用SPSSII.5统计软件，进行统计分析。各组表达记录，以均数主标准差(x±s)表示。各组间差异采用方差分析或t检验，相关性分析采用pearson相关系数法。
结果：
l、在肝癌组织和癌旁组织细胞中均可觅TGF-β1 mRNA阳性表达，肝癌组织中阳性表达率为68.75％(22/32)，癌旁肝组织中阳性表达率为75％(28/32)，表达差异无显著性(n＜40，确切概率P-0.1884)。结合计算机图像分析系统半定量分析显示：肝癌组织的TGF-β1mRNA阳性表达(61.999±8.796)％，癌旁组织为(58.595±2.187)％，肝硬化组织为(40.656±2.619)％。表达差异有显著性(t=5.435；P＜0.05)。肝癌组织中TGF-β1 mRNA高于癌旁组织中的表达。
2、良性病变肝组织和癌旁组织细胞中均可见TβR-II阳性表达，癌旁肝组织中为65.63％(21/32)，肝癌细胞表达低下甚至无表达9.38％(3/32)，差异有显著性(n＜40；确切概率计算P＝0.000).良性病变肝组织中为68％(17/25)。计算机图像分析系统半定量分析显示：肝癌细胞中可见TβR-II阳性表达(12.872±8.277)％，癌旁组织的表达为(52.656±2.619)％，肝硬化组织的表达为(62.595±2.287)％。肝癌与癌旁组织TβR-II的表达差异有显著性(t=9.257：P＜0.01)。肝癌与肝硬化组织中TIBR-II的表达差异有显著性(t＝15.277；P＜0.01)。肝癌组织TβR-Ⅱ蛋白低于癌旁组织和良性病变肝组织。
3、32例肝癌患者，按Edmondson分级，高分化肝癌(细胞分级Ⅰ级)12例(37.5％)，中分化肝癌(细胞分级Ⅱ～Ⅲ级) 13例(40.63％)，低分化肝癌(细胞分级Ⅳ级)7例(21.87％)。TβR-Ⅱ表达阴性的肝癌组织29例，其中高分化肝癌11例，占高分化组百分比为91.67％；中分化肝癌2例，占中分化组92.31％；低分化肝癌6例，占低分化组85.71％。高分化肝癌与低分化肝癌TβR-Ⅱ表达差异有显著性(t＝17.503：P＜0.01)。TGF-β1 mRNA表达阳性的肝癌组织22例，其中高分化肝癌7例，占高分化组百分比为58.33％；中分化肝癌8例，占中分化组61.54％；低分化肝癌7例，占低分化组100％。高分化肝癌与低分化肝癌TGF-β1 mRNA表达差异有显著性(t＝5.927；P＜0.05)。 4、高侵袭性肝癌TGF-β1 mRNA阳性表达率为94.44％(17/18)，低侵袭性肝癌TGF-β1 mRNA阳性表达率为35.71％(5/14)。两者TGF-β1 mRNA表达差异有显著性(n＜40，确切概率P＝0.000)。高侵袭性肝癌TβR-Ⅱ表达阳性率为5.56％(1/18)，低侵袭性肝癌TβR-Ⅱ表达阳性为14.3％(2/14)。高侵袭性肝癌及低侵袭性肝癌TβR-Ⅱ表达差异有显著性(n＜40，P＝0.011)。
结论：TGF-β1 mRNA在肝癌细胞和癌旁肝细胞中均可表达，TGF-β1 mRNA在PHC组织中表达高于癌旁组织的表达；PHC组织中TβR-Ⅱ蛋白表达低下或无表达，而癌旁组织中TβR-Ⅱ蛋白呈高表达。TβR-Ⅱ蛋白表达与TGF-β1 mRNA的表达相反。提示肝癌细胞TGF-β1 mRNA的高表达可能与肝细胞的过度增殖和肝细胞表TβR-Ⅱ的低下或缺失有关。说明TGF-β1 mRNA与TβR-Ⅱ共同维持细胞增殖调控的平衡。
TGF-β1在肝癌发生发展中发挥重要调控作用，本试验对TGF-β1mRNA和TβR-Ⅱ检测结果提示：肝癌TGF-β1在转录过程无障碍，而在翻译水平发生障碍，与TβR-Ⅱ低表达或失表达有关。TGF-β1负性调控作用的减弱可能TβR-Ⅱ蛋白表达低下而引起，TGF-β1抑制细胞增殖信号不能传入细胞内，TGF-β1虽过度表达而不能抑制肝癌细胞的增殖，导致肿瘤的发生与发展。癌组织中TGF-β1mRNA高表达和低TβR-Ⅱ低表达，提示预后不良。