共轭亚麻酸的改性及其对氧化、体外活性的影响

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共轭亚麻酸(Conjugated Linolenic acid, CLnA)是分子中含有三个共轭双键的十八碳直链脂肪酸。其具有优异的生物学活性,如强烈的抗癌活性、减少脂肪堆积、增加高密度脂蛋白和环前列腺素分泌、降血压、抗凝血和消炎等作用,因而引起了广泛的研究兴趣。但是共轭亚麻酸的氧化稳定性非常差,常温下仅经数小时即可发生氧化变质,这大大影响了产品的保质期,从而使其应用受到极大限制。为解决这一问题,本论文从酯化和包合这两种途径入手对共轭亚麻酸进行改性,并研究了改性对共轭亚麻酸的氧化稳定性的影响以及可能的氧化机制。此外,我们还初步评价了这两种改性方法对共轭亚麻酸的其他性质,包括结构、形态形貌、分散特性、体外释放、清除自由基能力、细胞活性等方面的影响,以及对改性方法做出全面的评价。对于酯化改性,本论文选用丙三醇、乙二醇、聚乙二醇400、儿茶素、原花青素这五种极性分子,分别和共轭亚麻酸羧基在非常温和的条件下发生催化缩合反应,得到其酯化衍生物。随后我们对产物进行了分离提纯,并采用红外光谱、紫外光谱、核磁共振等手段对其进行了结构表征,这部分研究工作主要体现在第二章中。随后,我们测定了纯化后的共轭亚麻酸酯衍生物在空气中的氧化稳定性,并与游离共轭亚麻酸相比较。结果表明改性后共轭亚麻酸的稳定性均得到了很大提高,且提高的幅度与所用的修饰分子的极性密切相关,极性比较大的儿茶素和原花青素的效果最好。其他性质研究表明:酯化衍生物在水中的分散能力大大提高,能够形成乳液甚至可直接溶解于水中,例如儿茶素-共轭亚麻酸酯和原花青素-共轭亚麻酸可以溶解在水中;酯化衍生物可以在模拟肠液中发生消化;酯化改性对产物的超氧阴离子自由基的清除能力增强、对神经交胶质瘤恶性肿瘤细胞的杀伤能力则没有太大影响。我们当前的研究结果初步表明:酯化改性在提高共轭亚麻酸产品稳定性、抗氧化能力的同时,没有影响共轭亚麻酸的体外释放、体外恶性肿瘤细胞杀伤能力,这部分工作主要体现在第三章中。对于包合改性,本论文选用β-环糊精作为包合原料,制备出了共轭亚麻酸包合物并优化了合成方法,得到了包封率较高的产品。随后的氧化稳定性结果表明,这种包合物的氧化稳定性得到了极大改善。游离共轭亚麻酸在50度空气中,大约30分钟就已经有90%发生了氧化;而同等条件下,所合成的共轭亚麻酸-β-环糊精包合物在氧化了12天后仍然有大约70%左右的脂肪酸剩余。我们发现整个包合物呈现为长约1μm,厚度约为50nm左右的片状固体。模拟胃液条件下的释放实验结果表明,这种包合物的氧化稳定性在得到了极大改善的同时,其在模拟胃液中的释放并未受到影响,这部分工作主要体现在第四章中。总之,我们的研究结果初步表明,酯化和包合这两种改性方法对于共轭亚麻酸的应用都是非常有价值的。最后,我们系统地总结了整个研究工作并进行了展望。
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