磁性壳聚糖微球的制备及固定化脂肪酶的研究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:hdjc1314
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磁性高分子微球是近年来开始研究的一种新型功能材料,在磁性材料、生物医学、细胞学、生物工程等诸多领域内有广泛的应用前景。壳聚糖磁性微球由于其优良的生物相容性、高强的稳定性和无毒副作用等优点而深受关注。壳聚糖磁性微球的表面有丰富的活性基团,经过活化后可以负载多种功能分子(如酶、抗体、肽、DNA及RNA等)。可作为磁性功能载体,在酶的固定化、靶向药物、细胞分离和免疫测定等领域能够应用。(1)本论文用共沉淀法制备纳米级Fe3O4磁流体,并对其用油酸进行表面改性。采用化学交联法,在分散有磁流体的壳聚糖溶液中,加入适量的戊二醛交联剂,制得内核为Fe3O4,外层包有壳聚糖的纳米级的磁性壳聚糖复合微球。考察了壳聚糖浓度、NaOH滴加量及搅拌速度等因素对磁性壳聚糖微球粒径及形貌等特性的影响,确定了磁性壳聚糖微球的制备最佳工艺条件,并用电镜、红外光谱图、粒径分析仪等仪器对磁性壳聚糖微球的形态与组成特性进行分析。最后得出,用该方法制备的磁性壳聚糖微球95.4%集中在332.7nm左右,平均粒径为348.5nm,分散系数为0.283,且微球表面富含羟基、氨基和醇羟基等官能团,可与多种生物分子结合。(2)以纳米级磁性壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂,进行固定化脂肪酶,并对脂肪酶的固定化条件进行优化,同时对固定化脂肪酶的理化性质、活性回收率、热稳定性和储存稳定性等性质进行研究。经过实验最后得出,脂肪酶的最佳固定化时间、最佳固定化pH值、固定化最佳酶的添加量分别为,7h、8、50℃和10mg/100mg(酶/微球)。和自由酶相比,磁性壳聚糖微球固定化脂肪酶的热稳定性、pH稳定性均得到明显提高;固化脂肪酶重复使用5次后,仍然保持82.6%相对活力。
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