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目的研究苯扎溴铵对人膀胱癌T24细胞体外增殖、周期的影响及凋亡的诱导作用,为进一步研究其抗肿瘤作用机制和临床应用于膀胱癌的腔内灌注治疗提供理论依据。方法1.采用MTT法以20μg/ml丝裂霉素C(MMC)作阳性对照,观察不同浓度的苯扎溴铵(0,0.1,0.5,1,5,10,100,1000μg/ml)作用不同时间(24h,48h,72h)对人膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用；2.收集不同浓度的苯扎溴铵(0,0.5,1,5,10μg/ml)作用24h的T24细胞,经碘化丙啶(PI)单染后流式细胞术(FCM)检测细胞周期的分布；3.倒置相差显微镜下观察不同浓度的苯扎溴铵作用不同时间(24h,48h,72h),人膀胱癌T24细胞形态学的变化；4.采用流式细胞(AnnexinV/PI双染)技术分析不同浓度苯扎溴铵作用24h,对人膀胱癌T24细胞凋亡的诱导作用。结果1.苯扎溴铵抑制人膀胱癌T24细胞的增殖：MTT结果示,不同浓度苯扎溴铵(0.1～1000μg/ml)作用人膀胱癌T24细胞24h,抑制率为5.30%～97.17%,呈剂量依赖性增大；各浓度组抑制率与阴性对照组比较,除0.1μg/ml浓度组外,余均有显著性差异(P<0.01)；苯扎溴铵各浓度组对T24细胞增殖抑制率与MMC组抑制率(22.84%)比较,差异均有显著性(P<0.01),其中5μg/ml浓度组抑制率为27.7%,与MMC组抑制效果差异的实际意义不大；不同浓度组苯扎溴铵随着药物作用时间的延长(48～72h),抑制率范围分别升至10.86%～97%和29.27%～99%,呈时间依赖性。2.流式细胞术分析不同浓度苯扎溴铵(0.5～10μg/ml)作用24h后的T24细胞周期结果显示,处于G2/M期的细胞比例随药物浓度升高而增多,分别为12.97%～44.64%,除0.5μg/ml浓度组外,其余各组较阴性对照组8.81%均有显著性差异(P<0.05),较MMC组的12.03%也有显著性差异(P<0.05)。3.倒置相差显微镜下观察结果示,当苯扎溴铵浓度≤10μg/ml作用24h,可见典型的凋亡细胞；当浓度≥100μg/ml时,见大量坏死细胞。4.流式细胞术分析不同浓度苯扎溴铵(0.5～10μg/ml)作用24h后的T24细胞凋亡结果示,早期凋亡率分别为6.25%-24.43%,总的凋亡率分别为12.12%～50.72%,呈剂量依赖性升高；与阴性对照组1.63%及2.70%相比均有显著性差异(P<0.05),与MMC组18.40%及24.95%比较,除5μg/ml浓度组外(P=0.091),其余各组均有显著性差异(P<0.05)。结论1.苯扎溴铵在体外可以明显抑制人膀胱癌T24细胞的增殖,其抑制作用呈明显的剂量和时间依赖性。2.不同浓度苯扎溴铵(0.5～10μg/ml)在体外作用人膀胱癌T24细胞,引起细胞周期G2/M期阻滞,呈剂量依赖性。3.高浓度苯扎溴铵(≥100μg/ml)在体外可直接导致人膀胱癌T24细胞坏死,低浓度(0.5～10μg/ml)则诱导细胞发生凋亡,其凋亡诱导作用呈时间和剂量依赖性。4.5μg/ml浓度的苯扎溴铵与20μg/ml浓度的丝裂霉素C在体外对人膀胱癌T24细胞的增殖抑制作用及凋亡诱导作用效果相当。