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目的:研究脂毒性对胰岛βTc6细胞TLR4/JNK/Bax通路的影响,以及细胞凋亡和胰岛素分泌的变化,并探讨Exendin-4对上述机制的干预作用。方法:1.体外培养胰岛βTc6细胞,将βTC6细胞分对照组、BSA(Bovine Serum Albumin,牛血清白蛋白)组(0.5%BSA)、棕榈酸(Palmitic acid,PA)组(0.5mmol/L)干预24小时,流式细胞术测定细胞凋亡水平,同时ELISA法检测胰岛素分泌水平,Western Blot法检测TLR4、p-JNK、JNK、Bax及Bcl-2蛋白表达情况。2.分别使用TLR4阻滞剂(CLI-095)或JNK阻滞剂(SP6001215),将βTC6细胞分为六组,分别为对照组、PA组(0.5mmol/L的PA干预24h)、CLI-095组(3umol/L CLI-095处理细胞24h)、SP600125组(25umol/L SP600125处理细胞24h)、PA+CLI-095组(3umol/L CLI-095预处理细胞4h,再予3umol/L CLI-095+0.5mmol/L的PA处理细胞24h)和PA+SP600125组(25umol/L SP600125预处理细胞4h,再予25umol/L SP600125+0.5mmol/L的PA处理细胞24h),观察Bax及Bcl-2蛋白表达水平。3.探讨Exendin-4对PA介导的βTC6细胞脂性凋亡的保护作用。将βTC6细胞分对照组、PA组(0.5mmol/L PA干预24h)、Exendin-4组(50nmol/L Exendin-4干预24h)及Exendin-4+PA组(50nmol/L Exendin-4预孵育细胞24h后再与50nmol/L Exendin-4联合0.5mmol/L PA共同干预24h),流式细胞术观察细胞凋亡水平,ELISA法检测胰岛素分泌水平,Western Blot法检测TLR4、p-JNK、JNK、Bax及Bcl-2蛋白表达情况。结果:1.PA作用24h后,细胞凋亡率升高;胰岛素分泌功能下降;TLR4、p-JNK、Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调。PA诱导的脂毒性凋亡在应用TLR4阻滞剂或JNK阻滞剂后Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调。2.Exendin-4干预后,胰岛β细胞凋亡率减少,胰岛素分泌功能改善,TLR4、p-JNK、Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白水平上调。结论:1.PA可以通过TLR4/JNK/Bax通路介导胰岛β细胞的脂性凋亡。2.Exendin-4可能部分通过抑制TLR4-JNK-Bax通路,拮抗PA介导的β细胞脂性凋亡,改善胰岛素分泌功能。