国人正常颅内动脉及颅内动脉瘤相关基因表达谱的初步研究

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目的:1.建立正常颅内动脉的基因表达谱,为下一步研究颅内动脉相关性疾病的发病机制提供理论基础:2.探讨胎儿颅内动脉与成人颅内动脉基因表达谱的差异,寻找与颅内动脉发育相关的基因,为研究颅内动脉发育障碍性疾病的病理机制提供理论依据;3.应用基因芯片技术分析颅内动脉瘤与正常颅内动脉基因表达谱之间的差异,从分子水平阐明颅内动脉瘤的发病机制,为寻找颅内动脉瘤的早期诊断和筛选提供可能的分子标记物,同时为颅内动脉瘤的防治提供潜在的分子靶点.方法:1.收集3例意外死亡的中国正常成年男性颅内Willis动脉环及主要分支,抽提动脉组织中的总RNA,体外逆转录为cDNA,反转录为生物素标记的cRNA,片段化后与Affyrmetrix基因芯片公司的人类基因组芯片U133A杂交,扫描杂交信号并用专用分析软件进行数据处理和分析;2.收集3例意外流产的正常胎儿颅内willis动脉环及主要分支,抽提组织中的总RNA,体外逆转录为cDNA,反转录为生物素标记的cRNA,片段化后与Affymetrix公司的人类基因组芯片U133A杂交,扫描杂交信号并用专用分析软件分析,同时将结果与正常成人颅内动脉基因表达谱进行比较,找出差异表达的基因,同时随机挑选3个基因用荧光定量RT-PCR对结果进行验证;3.收集3例手术切除的颅内动脉瘤标本,抽提组织中的总RNA,体外逆转录为cDNA,反转录为生物素标记的cRNA,片段化后与Affymetrix公司的人类基因组芯片U133A杂交,扫描杂交信号并用专用分析软件进行数据处理和分析,并将结果与正常成人颅内动脉基因表达谱进行比较,筛选出颅内动脉瘤中差异表达的基因.结论:1.初步建立了中国正常成人颅内动脉组织的基因表达谱,该基因表达谱的建立为研究颅内动脉相关性疾病的发病机制奠定了基础;2.建立了人胎儿颅内动脉组织的基因表达谱,证明了颅内动脉的正常发育是由众多基因共同调控的,研究这些基因的功能可能有助于认清颅内动脉发育相关性疾病的发病机制.3.首次利用基因芯片技术对国人颅内动脉瘤组织中的差异表达基因进行了大规模的分析,结果表明细胞凋亡异常、细胞信号转导和通讯障碍、细胞外基质的重塑、细胞骨架的破坏、免疫和炎症损伤及动脉粥样硬化可能是颅内动脉瘤形成的重要分子机制.
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