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人促甲状腺激素受体A亚基（TSHR A）在促甲状腺素受体抗体（TRAb）的产生、Graves病患者血清中促甲状腺素受体抗体（TRAb）的检测、Graves病可能的免疫治疗等方面均有重要意义。鉴于天然TSHR A亚基无法获得,真核体系表达所获得的融合蛋白产量甚微。获取充分TSHR蛋白A亚基成为Graves病诊治和研究的热点、难点,为此,本研究采用分子生物学技术,试图建立TSHR A亚基的原核表达体系,在大肠杆菌表达和获取TSHR A亚基片段。目的构建人促甲状腺激素受体（TSHR）A亚基的原核表达载体pET102/D-TOPO/TSHR A,在大肠杆菌中表达并分析其免疫活性。方法采用聚合酶链式反应扩增TSHR A基因编码序列,定向连接到载体pET102/D-TOPO中,经聚合酶链式反应、酶切、测序鉴定后转化大肠杆菌BL21StarTM（DE3）;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达TSHR A融合蛋白,超声裂解细菌,SDS-PAGE、Western-Blot对其进行鉴定,在变性、复性、镍柱纯化后,目的蛋白与Graves病人血清结合鉴定其免疫活性。结果成功构建pET102/D-TOPO/TSHR A亚基表达载体,优化融合蛋白表达条件,SDS-PAGE鉴定重组质粒可表达47KD大小的特异性蛋白,Western-Blot鉴定其被His抗体、鼠源性抗TSHR多克隆抗体所识别,复性后融合蛋白与Graves病人混合血清呈强阳性结合,相反正常人血清未有任何形式的结合。结论pET102/D-TOPO/TSHR A亚基表达载体在大肠杆菌中表达的TSHR A融合蛋白可用作抗原检测Graves病患者血清中的促甲状腺素受体抗体。