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研究目的: 研究白术内酯Ⅰ对人MyD88+卵巢癌细胞中吲哚胺-2,3双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase IDO)蛋白表达水平的影响。研究人MyD88+卵巢癌细胞与健康人外周血T淋巴细胞共培养后,白术内酯I对T淋巴细胞增殖活性的影响。 研究方法: 本研究采用Western Blot法:检测白术内酯Ⅰ对MyD88+人卵巢癌细胞中吲哚胺-2,3双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase IDO)蛋白表达水平的影响。应用MTT比色法:检测MyD88+卵巢癌细胞与健康人外周血T淋巴细胞共培养后,白术内酯Ⅰ对T淋巴细胞增殖活性的影响。 研究结果: 1、人 MyD88+卵巢癌细胞株中存在吲哚胺-2,3双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase IDO)蛋白的高表达。 2、白术内酯Ⅰ能够抑制人MyD88+卵巢癌细胞株IDO的表达。且不同浓度的白术内酯Ⅰ诱导人MyD88+卵巢癌细胞株培养24h、48h后,随着白术内酯Ⅰ药物浓度的增加或药物作用时间的延长抑制IDO蛋白表达水平越明显。 3、WesternBlot法结果示:白术内酯Ⅰ药物浓度为10umol/L和白术内酯Ⅰ药物浓度为50umol/L时诱导人MyD88+卵巢癌细胞24h后下调肿瘤细胞内IDO蛋白表达的倍数无明显差异(P>0.05)。 4、白术内酯Ⅰ的不同药物浓度诱导人 MyD88+卵巢癌细胞,随着白术内酯Ⅰ药物浓度的升高、作用时间的增加,下调人 MyD88+卵巢癌细胞中IDO蛋白水平表达的倍数在药物诱导48小时、白术内酯 I浓度在100umol/L时最强(P<0.05),有显著性差异。 5、不同药物浓度(10umol/L、50umol/L、100umol/L)白术内酯I和不加药分别诱导不同比例的人 MyD88+卵巢癌细胞与正常人外周血 T淋巴细胞共培养72小时后,随着白术内酯Ⅰ药物浓度升高,T淋巴细胞的增殖越明显(P<0.05); 6、在白术内酯Ⅰ相同的药物浓度下,不同比例的人MyD88+卵巢癌细胞与正常人外周血T淋巴细胞,在比例为S:T=8000个/孔:40000个/孔时,白术内酯Ⅰ药物浓度为100umol/L时,T淋巴细胞的增殖最明显。 研究结论: 1、人MyD88+卵巢癌细胞中存在IDO蛋白的高表达; 2、白术内酯Ⅰ通过抑制TLR4/MyD88信号通路的活性下调人MyD88+卵巢癌细胞中免疫抑制分子 IDO蛋白的表达水平并且呈时间依赖性和药物浓度依赖性; 3、白术内酯Ⅰ通过下调与T淋巴细胞相关的免疫抑制分子IDO蛋白的表达,避免了色氨酸的分解和代谢产物犬尿酸的累积,促进了T淋巴细胞的增殖活性,具有药物浓度依赖性。