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刚地弓形虫属于顶复门原虫,是一种专性寄生的胞内原虫,几乎能感染所有温血动物和人的有核细胞。弓形虫病（Toxoplasmosis）世界分布广泛,是一种人兽共患病,全世界大约有1/3的人感染弓形虫,初次感染的人症状不明显所以不被注意,但是一些非特征性的流感、艾滋病等一些比较不常见的并发症可能与人类首次感染弓形虫有关,感染弓形虫对母畜可导致流产及死胎等症状,弓形虫隐性感染的状态下在宿主体内形成包囊,带包囊的畜产品,对人类食品安全造成巨大危害。弓形虫依靠一些配体和受体之间相互作用入侵有核细胞,弓形虫侵入细胞后大量繁殖,从而导致疾病的发生,目前已经有很多关于弓形虫微线体、棒状体、膜表面、致密颗粒蛋白质作为抗弓形虫病的候选抗原的报道,但是这些候选抗原对宿主的保护作用均不理想。鉴于课题组前期研究发现疟原虫与肝素相互作用蛋白对虫体的发育和繁殖起着至关重要的作用,那么弓形虫与疟原虫同为顶复门原虫,将疟原虫肝素结合蛋白质PF3D71104400为模板,在ToxoDB中通过BLAST比对筛选到TGME49-209950蛋白质,该蛋白质在第Cys65至Cys68存在一个二硫化物活性位点基序-CXXC-,该活性位点是Trx在虫体发挥功能的重要位点,推测筛选到的蛋白质对弓形虫的繁殖起着重要作用。本实验通过生物信息学分析,发现TGME49-209950蛋白质有5个糖胺聚糖结合基序,和一个保守性很高的Trx结构域,根据糖胺聚糖结合基序和硫氧还蛋白功能域的位置,将该蛋白质截为两段,分别为带有Trx结构域和糖胺聚糖结合基序的TGME49209950-N762蛋白质及只含有糖胺聚糖不含有Trx结构域的C端蛋白质TGME49209950-C612,将两段基因序列分别进行原核表达和蛋白质纯化。以带有His标签的重组蛋白质免疫实验动物,制备多克隆抗体,然后利用Western-blot方法对多克隆抗体进行目的抗原的特异性检测,用间接免疫荧光（IFA）方法对该蛋白质在虫体侵入细胞的过程中的游离阶段、部分侵入阶段及完全侵入阶段进行跟踪定位,发现该蛋白在不同时期均表达在虫体的微线体和致密颗粒中。通过pull down和IFA实验验证了目的蛋白质黏附宿主细胞;体外抗氧化实验证明了带有Trx功能域的N段蛋白质具有抗氧化的功能;体外保护质粒DNA实验发现该蛋白质具有抵御氧自由基的攻击保护质粒完整性的功能。