葡萄试管苗的多倍体诱导

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本试验以二倍体“优无核”和“紫地球”两个葡萄品种的普通试管苗为材料,用秋水仙素和8-羟基喹啉对葡萄试管苗进行四倍体诱导。研究了秋水仙素浸泡法、培养基培养法、腋芽吸收法的3个浓度、3个处理时间对葡萄试管苗不同芽位染色体加倍的影响。以及对两个品种诱变分离筛选的第4代多倍体苗和原二倍体普通试管苗的叶绿素含量、SOD、CAT、POD、PPO进行了测定:对第5代染色体加倍试管苗的夏芽生长、叶片气孔密度、生根及根量等进行了观测,研究了人工诱变多倍体试管苗和原品种普通试管苗的形态特性和生理生化差异,为葡萄试管多倍体育种提供参考依据。主要研究结果如下:1、三种方法中,“优无核”秋水仙素溶液浸泡法M1代加倍率最高,其中48小时处理染色体加倍株率最高达34.98%;培养基培养法处理6天诱变效果最好,加倍率最高达23.63%;腋芽吸收法处理4天加倍率最高为22.98%。“紫地球”浸泡法M1代加倍率也最高,其中48小时处理染色体加倍株率高达35.79%;培养基培养法处理8天诱变效果最好,加倍率达到28.54%;腋芽吸收法处理6天加倍率最高为23.78%。两品种试管苗秋水仙素处理浓度都以0.1%最好。2、处理“优无核”两种药剂浸泡法相比,秋水仙素溶液的染色体加倍株率高达34.98%,8-羟基喹啉的最高只有20%。秋水仙素和8-羟基喹啉都对葡萄试管苗有诱变作用和毒害作用。秋水仙素溶液浓度越大,加倍率越高,但同时死亡率也越高。“优无核”0.05%、0.1%和0.2%浓度加倍率分别达到了15.56%、36.39%和37.57%。“紫地球”0.05%、0.1%和0.2%浓度加倍率分别达到了17.8%、36.88%和38.00%。秋水仙素不同浓度、不同处理时间对植株生长的抑制作用不同,随浓度和处理时间的增加,植株受到的抑制作用加强。3、三种方法的诱变效果以浸泡法最好,最高加倍率为38.00%,培养基法次之,最高加倍率为30.70%,腋芽吸收法最差,最高加倍率为25.64%。4、浸泡处理对不同节位芽的诱变效果不同。上部茎段腋芽处理诱变率较高,但组织幼嫩,浸泡易死亡。下部茎段芽发育早,浸泡时较耐药剂处理,致死率较低。5、三种处理方法中,“优无核”浸泡法和培养基培养法中顶芽诱变率分别在18.42%—25.41%、17.46%—21.79%,均比4芽的23.4%-36.67%、5芽22.22%—26.96%低;腋芽吸收法2芽诱变率在17.99%-20.17%之间,比3芽的21.63%—22.98%之间低。“紫地球”浸泡法和培养基培养法中顶芽诱变率在19.66%—26.39%,均比4芽的23.67%—35.79%、5芽22.4%—34.29%低,腋芽吸收法2芽诱变率在17.42%—20.86%,比3芽的22.71%—23.78%低。所以,在浸泡法和培养基培养法中处理4、5芽加倍效果较好;腋芽吸收法中处理3芽加倍效果好。6、培养基培养法的致死率较高,浸泡法次之,腋芽吸收法最低。“优无核”三种方法的致死率最高分别达到了56.7%、16.%7和10%。“紫地球”三种方法的致死率最高分别达到了63.3%、16.7%和13.3%。7、诱变苗与普通苗在形态学和细胞学观察中存在差异,染色体加倍率高的诱变苗较普通苗生长旺盛;诱变苗气孔密度较普通苗小,经方差分析二者达到差异显著水平,“优无核”诱变苗和普通苗的气孔密度分别为140.6 NO./1mm~2、174.3 NO./1mm~2,“紫地球”诱变苗和普通苗的气孔密度分别为141.7 NO./1mm~2、177.7 NO./1mm~2。8、通过测定诱变苗和普通苗的叶绿素含量、SOD、CAT、POD、PPO二者都达到差异显著水平,但可溶性蛋白差异不显著。两品种诱变苗的叶绿素含量、SOD、CAT均比普通苗的大,POD和PPO均比普通苗的小。
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