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[目的]探讨脑缺血及脑缺血再灌注过程中,脑血流量的动态变化。研究脑缺血及脑缺血再灌注脑脊液的蛋白组学。[方法]1.用线栓法建立脑缺血及脑缺血再灌注模型,将135只SD大鼠,随机分为15组,每组9只。分别是sham组,缺血0.5h组,缺血2h组,缺血3h组,缺血4h组,缺血4.5h组,缺血6h组,缺血8h组,缺血0.5h再灌注2h组,缺血2h再灌注2h组,缺血3h再灌注2h组,缺血4h再灌注2h组,缺血4.5h再灌注2h组,缺血6h再灌注2h组,缺血8h再灌注2h组。2.本实验采用激光散斑血流仪测量五个脑区的血流值并对模型进行行为学评价及TTC染色。3.抽取脑脊液做蛋白组学分析。4.结合质谱结果,选取半暗带及梗死核的脑皮质进行Q-PCR实验。[结果]1.脑血流值随着缺血时间的延长逐渐降低,在4.5小时达到最低值,4.5h到8h脑血流量值有所回升。脑缺血4.5h后再灌注并不能使脑血流量增加。2.缺血2h组与缺血0.5h组相比梗死体积有明显增加,差异在梗死体积方面具有显著统计学意义(p<0.01)。缺血6h组与缺血2h组相比梗死体积有明显增加,差异在梗死体积方面具有显著统计学意义(p<0.01)。脑缺血2h组与脑缺血2h再灌注2h组相比,梗死体积有所增加,差异在梗死体积方面具有显著统计学意义(p<0.01)。0.5h组比sham组的Zea-Longa评分明显升高,评分差异在神经功能评价方面显著统计学意义(p<0.01)。缺血2h组与缺血0.5h组相比,其Zea-Longa评分有明显增加,差异在神经功能评价方面具有显著统计学意义(p<0.01)。缺血6h组与缺血2h组相比Zea-Longa评分明显增加,差异在神经功能评价方面具有显著统计学意义(p<0.01)。脑缺血2h组与脑缺血2h再灌注2h组比,Zea-Longa评分没有明显变化。3.相对于sham组,所有的缺血组的A0A0G2K0N6蛋白的表达均升高。Sham组脑脊液中存在而缺血组消失的蛋白经过pcr验证为:D3ZS41(细胞外基质蛋白2,编码基因为Ecm2)。在脑脊液中假手术组没有而手术组有的蛋白经过PCR验证发现Q5M842,A2NB82,F1M5L5的变化与质谱结果一致。脑缺血再灌注后脑脊液中含量升高的蛋白有P47942(编码基因为:Dpysl2),Q6LE95(编码基因为:Kng1),P09606(编码基因为:Glul)。脑缺血再灌注后降低的蛋白经过pcr验证发现为:F1LM84(编码基因为Nid1),F1LS40(编码基因为Colla2),P02454(编码基因为Colla1),M9NW49(编码基因为Igf2),F1MAA7(编码基因为Lamc1)的变化趋势与质谱结果一致。[结论]1.大鼠脑缺血再灌注的时间窗为4.5h之前,4.5h之后的再灌注可能会加重脑损伤。2.蛋白组学结果提示脑脊液中可能存在脑缺血早期的诊断标志物,例如:A0A0G2K0N6 蛋白、Ecm2 等。