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本文以交联酶聚体（CLEAs）为主要研究内容，开发了两类CLEAs改进技术。首先以青霉素G酰化酶为研究对象，制备得到了青霉素G酰化酶CLEAs，并对其酶学性质进行了研究；针对CLEAs工业应用中粒径小，操作稳定性差的缺陷，开发了新型CLEAs微球制备工艺，并将所得微球应用于阿莫西林的酶法合成反应，获得了较好的催化效果。其次，针对-甘露聚糖酶CLEAs催化大分子底物传质效率低的缺陷，开发了大分子交联剂以替代传统的戊二醛，获得了具有多孔结构的新型-甘露聚糖酶CLEAs，提高了其对大分子多糖底物的催化效率。本文主要研究结论如下：青霉素G酰化酶CLEAs的制备及应用性质研究：以青霉素G酰化酶为研究对象，制备了PGA-CLEAs，其最优制备条件：沉淀剂为饱和硫酸铵、沉淀剂与纯酶液的体积比为2.3:1、交联剂为戊二醛、交联剂浓度为0.35%、交联时间为2h，最终制得的PGA-CLEAs酶活保留为30.1%。PGA-CLEAs的最适温度及pH值较游离酶均有所提高。青霉素G酰化酶CLEAs热失活动力学研究：青霉素G酰化酶经CLEAs技术固定后，热失活模型由一步失活变为多步连串失活，且每步失活反应活化能均较游离酶明显降低，解释了CLEAs比游离酶热稳定性明显提高的原因。青霉素G酰化酶CLEAs微球制备及性质研究：以增大CLEAs粒径，提高可操作性与稳定性为目的，开发了海藻酸钙-二氧化硅（ALG-SiO2）包埋CLEAs微球，其最佳制备条件：固化剂氯化钙浓度15mg/mL、固化时间40min；与海藻酸钙、壳聚糖、海藻酸钙-壳聚糖三类微球对比，其形貌规则、稳定性高、重复利用效果好，是制备CLEAs微球的优良载体。青霉素G酰化酶CLEAs微球在阿莫西林合成中的应用：将ALG-SiO2微球应用于阿莫西林合成反应中，确定最优反应条件：温度为25℃，pH为6.5，底物配比HPGM：6-APA=3:1，反应时间为75h，最终得到的阿莫西林收率为55.2%。当该微球重复利用四次后，其收率仍可达到最初收率的85%以上。新型-甘露聚糖酶CLEAs的制备：针对-甘露聚糖酶CLEAs催化大分子底物传质效率低的缺陷，利用大分子交联剂替代传统的戊二醛，对制备条件进行了优化：沉淀剂为异丙醇，沉淀剂与纯酶液的体积比为5：1，交联剂为聚醛葡聚糖（2000kDa），交联剂浓度为0.6%，交联时间为16h，由此获得-甘露聚糖酶CLEAs的最终酶活保留为2.67U/mg（64.66%），比传统交联剂戊二醛所制备的CLEAs酶活高16倍。