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目的:本课题根据中医传统理论,结合现代研究,通过复制慢性应激肝郁雌性大鼠模型,以舒肝补肾中药进行干预,分析肝郁对女性排卵功能及对血浆前列腺素E2(PGE2)、6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响,再次探讨肝郁与排卵功能异常的关系及舒肝补肾中药的作用机理,对排卵功能异常的治疗提供更为开阔的科研思路和临床治疗依据。 方法:以三月龄的Wistar雌性大鼠为研究对象,利用束缚筒和程控穿梭箱声-电刺激复制慢性应激肝郁大鼠模型,以绒毛膜促性腺激素(HCG)、尿促性腺激素(HMG)和中药舒肝补肾方为实验用药。将60只动情周期表现正常的大鼠随机分为5组,即正常对照组、肝郁模型组、HMG+HCG组、中药高剂量组、中药低剂量组,每组12只。在同种饲养条件下,正常对照组和肝郁模型组灌以等量蒸馏水,中药高、低组分别灌以舒肝补肾方浸膏稀释液高剂量(生药浓度约3.744g/ml)和低剂量(生药浓度约1.872g/ml),连续造模及给药20天。HMG+HCG组在造模的前17天同肝郁模型组一样给予蒸馏水,第18天每只大鼠腹腔注射HMG40IU,48h后再腹腔注射HCG50IU,24h后处死。造模20天后,除HMG+HCG组外其余各组经阴道涂片观察挑选处于动情期的大鼠并间隔24h处死,进行指标测定。动态观察大鼠动情周期的变化;对照观察卵巢组织形态学的改变;用放射免疫法检测大鼠血浆PGE2、6-Keto-PGF1α及血清TNF-α的含量。 结果:(1)肝郁模型组同正常对照组相比,大鼠的动情周期出现不同程度的紊乱;卵巢组织形态学观察,原始细胞数显著增多(P<0.05),黄体数显著减少(P<0.05);血浆PGE2、6-Keto-PGF1α及血清TNF-α含量异常显著降低(P<0.05)。(2)注射HMG和HCG后,同肝郁模型组相比,HMG+HCG组大鼠的紊乱动情周期并无明显改善;卵巢组织形态学观察,黄体数显著增多(P<0.05);PGE2、TNF-α含量显著升高(P<0.05),6-Keto-PGF1α的含量无显著差异(P>0.05);(3)经中药治疗后,大鼠紊乱的动情周期得到改善;卵巢组织形态学观察,卵巢组织的异常形态得到一定纠正,成熟卵泡数显著增多(P<0.05),黄体数显著增多(P<0.05);血浆PGE2及血清TNF-α含量显著升高(P<0.05),血浆6-Keto-PGF1α的含量无显著差异(P>0.05)。 结论:用束缚筒制动和声-电刺激复制的慢性应激肝郁动物模型,是一个比较合理的肝郁证动物模型。慢性应激刺激可致雌性大鼠神经免疫内分泌功能紊乱,从而导致排卵功能异常。本实验证明了中药舒肝补肾方能对抗慢性应激刺激对大鼠的影响,促进排卵功能的恢复。舒肝补肾方能明显改善大鼠动情周期的紊乱,其作用优于西药HMG和HCG;同时,舒肝补肾方还可改善卵巢的异常形态,使大鼠异常降低的PGE2、TNF-α的水平显著升高,6-Keto-PGF1α呈升高趋势,从而改善了微循环,促进卵子发育成熟和排卵。本实验从多方面探讨了舒肝补肾方对慢性应激肝郁模型大鼠排卵功能的调节作用,为临床运用舒肝补肾法治疗肝郁型排卵功能异常提供了有价值的客观依据。