藏药川西獐牙菜乙酸乙酯部位化学成分的研究

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川西獐牙菜Swertia mussotiiFranch为龙胆科獐牙菜属药用植物,也是著名的藏药“藏茵陈”的原植物之一,常年分布于海拔3600-3800 m的山坡、灌丛草地、林缘及河滩[1]。其全草在藏医药中的应用较为广泛,对黄疸型肝炎、胆囊炎疗效显著,同时具有清肝利胆的作用[2]。目前国内外报道的川西獐牙菜化学成分主要有(口山)酮、三萜、黄酮、生物碱和环烯醚萜五大类成分。通过前人对川西獐牙菜药理活性的实验研究表明,川西獐牙菜乙醇提取物以及从中分离出的部分单体化合物对乙肝病毒有明显的抑制效果,而其他类活性的报道相对较少。为了丰富川西獐牙菜中化学成分的种类及数量和进一步寻找其他活性成分,本文通过对川西獐牙菜乙酸乙酯部位化学成分的研究,并对所得的部分单体进行活性测试,为更深入的药效实验提供了初步参考。  将川西獐牙菜的干燥全草粉碎,再用95%乙醇渗漉提取植物化学成分,随后合并浓缩。待水分散所得浓缩液后,依次加入石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,减压浓缩后获取相对应的部位。其中获得乙酸乙酯部位浸膏 1058g,通过交叉反复运用各种分离手段如凝胶Sephadex LH-20、半制备HPLC、正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱,重结晶等进行处理直到获得单体化合物。然后,结合理化性质、TLC、HR-ESI-MS、1H NMR和 13C NMR等分析方法对分离得到的25个单体化合物进行结构鉴定,最终确定了17个单体化合物的结构,分别为:1,5,8-t rihydroxy-3-methoxyxanthone(1,5,8-三羟基-3-甲氧基(口山)酮,1)、1,7-dihydrox y-3,8-dimethoxyxanthone(1,7-二羟基-3,8-二甲氧基(口山)酮,2)、1-hydroxy-3,5,8-trimethoxyxanthone(1-羟基-3,5,8-三甲氧基(口山)酮,3)、1-hydroxy-3,7,8-trime thoxyxanthone(1-羟基-3,7,8-三甲氧基(口山)酮,4)、4,6,8-trihydroxy-1,2,3,5-tetr amethoxyxanthone(4,6,8-三羟基-1,2,3,5-四甲氧基(口山)酮,5)、mangiferin (芒果苷,6)、luteolin(木犀草素,7)、isoorientin(异荭草素,8)、isovitex in(异牡荆素,9)、swertiamarin(獐牙菜苦苷,10)、gentiopicroside(龙胆苦苷,11)、protocatechuic acid(原儿茶酸,12)、vanillic acid(香草酸,13)、oleanolic acid(齐墩果酸,14)、β-sitosterol(β-谷甾醇,15)、stigmasterol(豆甾醇,16)、β-daucosterol(β-胡萝卜苷,17)。其中1~6为(口山)酮类化合物,7~9为黄酮类化合物,10~11为环烯醚萜类化合物,12~13为酚类化合物,14为三萜类化合物,15~17为甾体类化合物。同时,化合物5为首次从龙胆科植物中分离得到,7、9、12、13为首次从该川西獐牙菜中分离得到。  此外,我们选用黑色素瘤B16细胞模型、神经胶质瘤C6细胞模型和肝癌He pG 2 细胞模型对所分离得到的部分单体化合物进行了细胞毒活性测试,研究结果表明,在细胞毒活性研究中,化合物5对神经胶质瘤C6细胞表现出相对明显的抑制活性,其IC50值达8.9 μM。
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