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藻胆蛋白是藻类吸收传递光能,进行光合作用的重要辅助色素蛋白。藻胆蛋白具有一系列的生物活性,能够在生物医药工程等多方面地发挥巨大的作用,具有超越相关领域内其他重要活性物质性能的特性。其中,藻红蛋白是研究较多的藻胆蛋白之一。坛紫菜(Porphyra haitanensis)含有丰富的藻红蛋白,又是我国最主要的栽培经济藻类之一,还是唯一原产自我国的紫菜,因此,从坛紫菜中提取纯化藻红蛋白,具有原料、价格上的优势。1、采用“溶胀+组织捣碎”法破碎坛紫菜叶状体细胞,对比了多次硫酸铵梯度盐析对破碎液中藻红蛋白的影响,并进一步用羟基磷灰石层析制备藻红蛋白,最后对所得蛋白做了光谱和电泳鉴定。结果表明,经过四次盐析,藻红蛋白吸收光谱纯度达到0.9(A564/A280),每次的最佳盐析浓度分别为15%,50%,10%和40%;7kg阴干紫菜经过四次盐析和一次羟基磷灰石层析后可获得507.82mg藻红蛋白(A564/A280>3.2)。2、对坛紫菜藻红蛋白α和β亚基基因进行了提取、序列测定及分析。根据已发表的藻胆蛋白基因序列保守区域设计引物,对提取自新鲜坛紫菜的DNA片段进行PCR和电泳鉴定,所得产物经测序得到含藻红蛋白α和β亚基基因的序列全长为1595bp (GenBank登录号为HM008260.1)。对藻红蛋白的基因序列做了分析,并对蛋白各亚基的氨基酸序列的理化参数、功能位点及空间构型进行了多角度预测。最后基于对序列开放阅读框、启动子、SD序列的分析,对坛紫菜分类地位进行了讨论,认为坛紫菜虽为真核生物,但由于起源过于悠久,分类地位低,具有原核生物的某些特征。3、研究坛紫菜藻红蛋白的光敏性质及其对肿瘤细胞BEL-7402的抑制效果。使用LED灯和氩离子激光器照射不同浓度的藻红蛋白,结果LED灯对于蛋白的作用比较温和,而激光对蛋白的损伤作用很强烈,照射时间过长会导致蛋白变性;藻红蛋白抑制细胞实验中,藻红蛋白浓度为240μ g/mL时对细胞有最大的抑制率,为其作用72h后的20%,并且在各个时间梯度的作用下,每个浓度的蛋白对BEL-7402细胞的抑制作用相当;使用LED灯和氩离子激光器照射,藻红蛋白介导的光动力作用对BEL-7402的最佳抑制效果分别达到了20%和74%。