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表皮毛是植物地上部分表皮细胞特化而来的毛状结构,根据其是否具有腺头分为腺毛和非腺毛,而依据其形态结构分为单细胞表皮毛和多细胞表皮毛。烟草表皮毛为多细胞的分泌腺毛,其分泌物与烟草香气品质密切相关。目前,拟南芥的单细胞表皮毛发育机制已得到较为全面的解析,而烟草腺毛发育机制尚不清晰。实验室前期发现转Ch IFN-γ（鸡干扰素γ）的烟草（Nicotiana.tabacum cv.Xanthin）腺毛数量大量增多,通过基因芯片筛选差异表达基因,得到可能与烟草腺毛密度相关的基因Nt HD20（LOC107765920）。Nt HD20属于HD-ZIPⅠ蛋白家族,包含同源异型结构域和亮氨酸拉链结构域。HD-ZIP蛋白家族包含四个亚家族,其中HD-ZIPⅣ与植物表皮毛发育相关,但HD-ZIPⅠ对烟草腺毛密度的影响尚未可知。本研究以Nt HD20为对象,通过在烟草（Nicotiana.tabacum cv.Xanthin）中过表达与沉默Nt HD20,统计其腺毛密度变化,检测过表达植株腺毛发育相关基因表达水平与内源激素变化,进而探究Nt HD20对烟草腺毛密度的影响。主要研究结果如下:1.Nt HD20组织表达分析利用q RT-PCR检测Nt HD20在烟草不同组织中的表达量。结果表明,Nt HD20在烟草不同组织中均有表达,在根中表达量最低,而在花、茎与叶中的表达量较根均显著升高,分别是根中的116倍、17倍和10.4倍。2.Nt HD20过表达与沉默通过农杆菌介导的叶盘转化法遗传转化烟草,Kan抗性筛选后利用GUS化学组织染色、基因组PCR以及q RT-PCR鉴定获得16株过表达Nt HD20烟草株系。同时构建p TRV2-Nt HD20载体,VIGS诱导沉默后q RT-PCR验证Nt HD20表达水平,结果显示沉默植株中Nt HD20表达量显著降低。3.Nt HD20对烟草腺毛的密度的影响烟草叶片通过0.2%罗丹明B染色,超景深显微镜观察,统计腺毛密度。结果表明,过表达植株中腺毛密度显著低于对照,较对照降低34.66%,而沉默植株中腺毛密度则显著高于对照,较对照升高42.42%,说明Nt HD20是烟草腺毛发育起始的负调控转录因子。4.Nt HD20影响腺毛发育相关基因的表达采用q RT-PCR检测过表达Nt HD20烟草的腺毛发育相关基因表达水平,结果显示:Nt Cyc B2（Nitab4.5-0014697g0010.1）在转Nt HD20基因烟草中的表达量为对照的1.77倍;Nt MYB123-like（LOC107773379）、Nt Wo-like（LOC107766155）与Ntab SPL6-1（LOC107789814）的表达量分别为对照组的0.14、0.48和0.49倍。说明过表达Nt HD20基因引起Nt Cyc B2表达量上调和Nt MYB123-like、Nt Wo-like、Ntab SPL6-1表达量下调,推测Nt HD20可能通过未知途径直接或间接调控Nt Cyc B2、Nt MYB123-like、Nt Wo-like和Ntab SPL6-1基因的表达,从而影响烟草腺毛的发育。5.Nt HD20影响烟草内源激素ABA与JA的含量采用高效液相色谱串联质谱法检测过表达Nt HD20烟草内源激素含量变化。结果表明,过表达植株内源ABA与JA平均含量显著降低,较对照分别降低43.67%与83.84%;而GA3以及SA含量相较于对照无显著性差异。说明过表达Nt HD20基因抑制植株内源ABA与JA的积累,推测Nt HD20可能通过未知途径调控ABA与JA的积累,进而影响烟草腺毛的发育。综上:Nt HD20是调控烟草腺毛密度的负调控因子,可能通过抑制ABA与JA的积累,并且下调腺毛发育重要基因（ab SPL6-1,MYB123,Wo）,同时上调细胞周期蛋白基因Cyc B2,从而降低烟草腺毛密度。