【摘 要】
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目的:应用HSP90功能特异性抑制剂格尔德霉素(geldanamycin,GA)研究HSP90在乳腺癌细胞增殖中的作用,探讨相关分子机制。方法:以人乳腺癌细胞株MDA-MB-435s为研究对象。应用MTT
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目的:应用HSP90功能特异性抑制剂格尔德霉素(geldanamycin,GA)研究HSP90在乳腺癌细胞增殖中的作用,探讨相关分子机制。方法:以人乳腺癌细胞株MDA-MB-435s为研究对象。应用MTT法检测GA对MDA-MB-435s细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析细胞周期;TRAP-ELISA法检测GA作用后细胞端粒酶活性变化;用Western-blot技术检测细胞内stat3磷酸化状态和突变型p53蛋白质表达变化;用RT-PCR和Western-blot技术检测细胞内HSP27、HSP70、HSP90mRNA和蛋白质表达变化,结果:不同浓度GA对乳腺癌MDA-MB-435s细胞有生长抑制作用,呈时效量效依赖关系,GA作用后细胞呈现G2/M期阻滞,细胞内端粒酶活性下降。400nmol/LGA处理细胞48h后,细胞内stat3磷酸化水平明显下降(为对照组的55%),突变型p53表达明显下调(为对照组的48%),表达差异有显著性(P<0.05)。GA作用后HSP27、HSP70和HSP90mRNA表达升高,分别为对照组的1.33倍、2.21倍和1.17倍;HSP27、HSP70和HSP90蛋白表达亦增高,分别为对照组的1.67倍、2.1倍和1.2倍,以HSP70增高最明显,表达差异有显著性(P<0.05)。
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