目的:研究Connexin31（Cx31）及上皮间质转化（EMT）相关因子等在甲状腺乳头状癌（PTC）组织及细胞系中的表达；旨在探讨Cx31在PTC发生、发展及侵袭转移中的作用及其与PTC临床病理特征之间的关系，并研究Cx31与EMT相关因子等在PTC组织中表达的相关性，借以研究EMT机制在PTC浸润转移过程中发挥的作用，为早期预测PTC淋巴结转移、远处转移、评估预后提供新的分子标志，为甲状腺肿瘤的分子靶向治疗提供依据。　　方法:搜集97例PTC组织（分为PTC中央组97例、PTC浸润前缘组84例、淋巴结内转移PTC组21例），癌旁正常甲状腺组织（距离病灶区边缘≥2cm，共94例）做为对照，术前均未经过放化疗及免疫治疗。结合HE染色下组织形态学特点进行组织学分型及分级，判断PTC组织的分化程度。采用免疫组化SP法检测TTF-1、Tg、Vimentin的表达，采用免疫组化EliVision法检测Cx31、E-cadherin、β-catenin的表达。体外细胞培养，选取两种不同分化程度的PTC细胞株，IHH-4细胞株（高分化PTC细胞）、BCPAP细胞株（BRAF基因突变，低分化PTC细胞），另选择甲状腺滤泡癌细胞株TT2609做为对照，所有细胞均购自German Collection of Microorganisms and Cell Cultures。应用细胞石蜡切片的方法制片，采用免疫组化EliVision法检测Cx31、E-cad、β-cat、Vimentin、TTF-1、Tg的表达。应用SPSS13.0软件进行统计分析，计数资料阳性率应用四格表卡方检验、Fisher确切概率法、Kappa检验，等级资料应用两个及多个独立样本的秩和检验，EMT相关因子之间的比较应用Spearman相关。　　结果: 1、EMT相关因子E-cadherin、β-catenin、Vimentin、TTF-1、Tg在PTC组织及体外培养细胞系中的表达及EMT相关因子之间的关系。PTC组织中各因子的表达.E-cadherin阳性主要定位于细胞膜，在正常甲状腺滤泡上皮细胞胞膜上可见棕黄色颗粒，而在PTC组织及细胞系中可见胞膜及胞浆内的表达。β-catenin阳性主要定位于细胞膜，在正常甲状腺滤泡上皮细胞胞膜上可见棕黄色颗粒，尤以细胞膜腔缘着色显著，而在PTC组织中胞膜表达减弱或丢失，并可见胞浆或胞核的异位表达，在中央区的肿瘤细胞细胞核β-catenin呈强阳性，但在浸润前缘肿瘤细胞膜着色及核染色明显下降。Vimentin阳性主要定位于细胞膜及细胞浆，在正常甲状腺滤泡上皮细胞胞膜上主要定位于基底膜上，而在PTC组织内着色位于基底膜及胞浆内。TTF-1阳性定位于细胞核，在正常甲状腺滤泡上皮细胞胞核及PTC甲状腺癌细胞胞核呈棕黄色。Tg阳性定位于细胞浆，特别是在内腔缘着色，呈棕黄色。EMT相关因子在各组表达的比较，结果显示：E-cadherin、β-catenin、TTF-1、Tg在PTC浸润前缘组、PTC中央组的表达均较对照组中表达下调（P＜0.05）；E-cadherin、β-catenin、TTF-1、Tg在PTC浸润前缘的表达均较PTC中央的表达下调（P＜0.05）；Vimentin在实验组的表达均较对照组中表达上调（P＜0.05），Vimentin在PTC浸润前缘较PTC中央未见明显染色增强。在PTC组织中β-catenin与TTF-1的表达具有相关性。体外培养细胞系中各因子的表达.各因子在体外甲状腺癌细胞中的表达定位同体内PTC组织，由于细胞是散在的，无滤泡或乳头结构形成，不能区分腔缘或基底侧，因此细胞膜着色时不能具体定位着色部位。另外β-catenin的异位着色只见于胞浆内，未见胞核着色。BCPAP、TT2609细胞株中E-cad表达较IHH4细胞株中表达下调（P＜0.05）；TT2609细胞株中β-cat、Tg的表达较IHH4细胞株下调（P＜0.05）；IHH4细胞株中TTF-1的表达较TT2609细胞株下调（P＜0.05）,而Vimentin在三种细胞株中的表达无明显差异。2.Cx31在PTC组织及体外培养细胞系中的表达及其与EMT相关因子的关系.Cx31阳性主要定位于细胞浆，在甲状腺乳头状癌组织中呈弱表达。PTC浸润前缘、PTC中央及淋巴结内转移PTC组织中Cx31的表达较正常甲状腺组织下调（P＜0.05）。而PTC浸润前缘与PTC中央、PTC浸润前缘与淋巴结内转移PTC组织、PTC中央与淋巴结内转移PTC组织的Cx31表达无显著差异（P＞0.05）。BCPAP细胞株中Cx31表达较IHH4细胞株中表达下调（P＜0.05）。IHH4细胞株与TT2609细胞株（P＞0.05）、BCPAP细胞株与TT2609细胞株（P＞0.05）的Cx31的表达无显著差异。Cx31在 PTC组织及细胞系中的表达与E-cad、β-cat、Vimentin、TTF-1、Tg的表达无明显相关性（P＞0.05）。在BCPAP细胞株中Cx31的表达与E-cad的表达中度一致（Kappa=0.6154）。3.PTC中Cx31、E-cad、β-cat、Vimentin、TTF-1、Tg的表达与临床病理因素的关系。Cx31、E-cad、TTF-1、Tg的表达与分化程度相关（P＜0.05），其中高分化组与中分化组比较（P＜0.05）时随着分化程度的降低Cx31、E-cad、TTF-1、Tg表达下调，但在与低分化组比较时并未发现明显的相关性（P＞0.05），考虑为低分化组例数太少所致，加大标本量可能会表现出一定的相关性。Cx31蛋白的表达与伴有钙化（P＜0.05）相关，有钙化的病例Cx31表达阳性率较无钙化的高。TTF-1的表达与伴有淋巴结转移、AJCC分期相关（P＜0.05），有淋巴结转移、AJCC分期高的TTF-1表达降低。β-cat的表达与伴有桥本氏甲状腺炎相关（P＜0.05），伴有桥本氏甲状腺炎的病例β-cat表达降低。　　结论:1、EMT机制在PTC发生发展及浸润过程中发挥重要促进作用；PTC浸润前缘的癌细胞分化程度更低，更具有侵袭能力及运动性，更易发生EMT改变并趋向转移，是PTC浸润转移的先锋。另外EMT产生的分子机制是多方面的，参与其中的各因子相互联系相互制约，本研究发现β-catenin与TTF-1在PTC组织中的表达具有相关性，具体机制尚不清楚，可能与Wnt信号途径有关。2、Cx31在细胞浆而不是细胞膜上的表达，支持了非GJIC依赖的作用机制的假说。Cx31在PTC组织及体外培养细胞系中的表达降低或失表达使得癌细胞的浸润转移能力增强，说明Cx31在PTC的发生发展中起到肿瘤抑制因子的作用，证实了Cx31与PTC的浸润转移能力存在相关性。3、EMT过程中Cx31的下调与E-cad的下调可能存在密切联系，Cx31可能参与了EMT机制的某一过程。4、Cx31、E-cadherin、TTF-1、Tg的表达与分化程度相关，Cx31、E-cadherin、TTF-1、Tg可以作为临床判断PTC分化程度的指标；AJCC分期高或有淋巴结转移的病例TTF-1表达降低，TTF-1的表达与多个预后不良因素相关。