RNA干扰沉默膀胱癌T24细胞肝素酶基因后肝素酶的表达及对细胞增殖的影响

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目的1.研究肝素酶基因在人膀胱移行细胞癌T24细胞中的表达情况2.研究特异性siRNA对T24细胞中肝素酶基因表达的抑制作用3.研究特异性siRNA对T24细胞增殖的影响方法体外化学合成肝素酶特异性双链RNA(dsRNA),用脂质体2000转染T24膀胱移行细胞癌细胞,用四唑盐(MTT)法检测细胞生长情况,反转录聚合酶链法(RT-PCR)检测肝素酶基因mRNA的表达,Western-Blot法检测肝素酶基因蛋白的表达。结果肝素酶基因在人膀胱移行细胞癌细胞系T24中呈高表达状态。RNA干扰沉默T24膀胱移行细胞癌细胞肝素酶基因后,T24细胞生长活力下降,三组不同干扰组细胞活力分别下降了(28.55±3.66)%,(27.20±3.25)%和(37.29±4.82)%,肝素酶mRNA及蛋白表达水平明显下降。结论1.肝素酶在人膀胱移行细胞癌T24细胞的mPdqA及蛋白水平高表达2.特异性siRNA对T24细胞中肝素酶基因表达有明显的抑制作用3.特异性siRNA能有效抑制T24细胞增殖,三组不同干扰组细胞活力分别下降了(28.55±3.66)%,(27.20±3.25)%和(37.29±4.82)%。
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