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目的观察硫化氢缓释供体ADT后处理是否对大鼠在体心肌缺血再灌注(I/R)损伤具有保护作用,探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)介导的自噬流在其中的作用,研究硫化氢后处理心肌保护的机制。方法成年雄性SD大鼠202只,建立急性大鼠在体心肌I/R损伤模型。随机分为9组:假手术组(Sham组)、单纯缺血再灌注对照组(I/R+vehicle组)、缓释硫化氢供体ADT后处理组(I/R+ADT组)、单纯ADT对照组(Sham+ADT组)、AMPK抑制剂Compound c组(I/R+ADT+CC组)、Compound c溶剂二甲基亚砜对照组(I/R+ADT+DMSO组)、氯喹溶剂生理盐水对照组(I/R+ADT+NS组),自噬流抑制剂氯喹组(I/R+ADT+CQ),单纯氯喹对照组(I/R+CQ组)。除Sham和Sham+ADT组外,其余各组均缺血30 min,再灌注4 h。Sham,I/R+vehicle和I/R+CQ组于缺血末再灌注开始即刻腹腔注射ADT溶剂(10%DMSO+玉米油),其余各组均注射ADT(50 mg/kg);I/R+ADT+CC和I/R+ADT+DMSO组于再灌注开始即刻分别静脉给予Compound c(250μg/kg)和等体积DMSO;I/R+ADT+CQ和I/R+CQ组于手术开始前1 h腹腔注射氯喹(10 mg/kg),I/R+ADT+NS组注射等体积生理盐水。再灌注4 h末,提取心脏,采用氯化三苯基四氮唑染色法(TTC法)测定心肌梗死范围并通过苏木精-伊红染色法观察心肌细胞形态学变化;采用原位二氢乙啶(DHE)染色法检测活性氧(ROS)的生成。采用免疫印迹法(Western blot技术)检测p-AMPK/t-AMPK、p-S6/t-S6、Beclin-1、LAMP-2、LC3Ⅱ/Ⅰ及P62蛋白表达水平。结果与Sham组和Sham+ADT组比较,各组心肌梗死范围增大,心肌细胞损伤增加,ROS生成增多,Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ和P62蛋白表达上调,LAMP-2蛋白表达下调(P<0.05)。与I/R+vehicle组比较,I/R+ADT组心肌梗死范围减小,心肌细胞损伤和ROS生成减少,p-AMPK/AMPK及LAMP-2蛋白表达上调,p-S6/S6、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ及P62蛋白表达下调(P<0.05)。与I/R+ADT组比较,I/R+ADT+CC组心肌梗死范围增加,细胞损伤和ROS生成增加,p-AMPK/AMPK及LAMP-2蛋白表达下调,p-S6/S6、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ及P62蛋白表达上调(P<0.05)。与I/R+ADT组比较,I/R+ADT+CQ组心肌梗死范围增加,LAMP-2蛋白表达下调,LC3Ⅱ/Ⅰ和P62蛋白表达上调(P<0.05)。结论硫化氢缓释供体ADT对大鼠在体心肌I/R损伤具有保护作用,可能是通过激活AMPK,减少再灌注期间自噬体清除的破坏,保护了自噬流,进而抑制再灌注期间细胞内ROS的生成和细胞死亡。