斜带石斑鱼orexin前体的克隆及其mRNA表达特性的初步研究

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本文采用RT-PCR的方法和cDNA末端快速扩增技术(RACE),从斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)下丘脑总RNA中进行扩增,得到了斜带石斑鱼orexin前体cDNA的全序列。该cDNA全长711bp,编码区447bp,所编码的orexin前体蛋白为149个氨基酸,包括46个氨基酸的信号肽,43个氨基酸的orexinA,27个氨基酸的orexinB和末尾33个功能不详的氨基酸。同源性分析表明,斜带石斑鱼orexin前体氨基酸序列与河豚orexin前体的同源性为61.1%,与哺乳动物orexin前体的同源性在32.8%-37.7%之间。orexinA和orexinB氨基酸序列的同源性要比信号肽的高,而orexinB又比orexinA保守。 采用RT-PCR结合Southernblot,对orexin前体在斜带石斑鱼成体各组织的表达情况进行了初步的研究。研究显示,在各个脑区中,orexin前体mRNA只在下丘脑、中脑、端脑中表达,其中在端脑中的表达非常微量,而在各外周组织中均未检测到orexin前体mRNA的表达。orexin前体mRNA在斜带石斑鱼下丘脑中的表达,提示着orexin参与摄食的调节。 本研究对斜带石斑鱼orexin前体的分子生物学特征有了最基本的认识,为orexin应用于鱼类养殖提供了理论基础。
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