龙胜凤鸡禽白血病流行调查及其病毒株的分离鉴定

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禽白血病(AL)是由一类禽白病病毒(ALV)相关病毒引起的多种肿瘤性疾病的总称,病死率低,主要危害育种鸡群,引起生产性能下降和免疫抑制,死淘率升高。课题组前期的调查显示,广西地区5个地方品系ALV的流行病学调查证明都存在ALV的感染,但一些珍贵的数量较少的地方品种如龙胜凤鸡等还没有进行过ALV的流行病学调查。本课题首先利用商品化的ELISA检测试剂盒对广西桂林龙胜凤鸡进行ALV的流行病学调查,对276只生产种鸡分别采集其肛拭子(217份)和蛋清样品(59份)以及血清样品276份,分别进行ALV群特异性抗原p27和A/B、J亚群抗体的检测。检测的结果显示,p27抗原的总阳性率为26.45%(73/276),其中肛拭子样品的阳性率(28.57%,62/217)高于蛋清样品的18.64%(11/59);A/B亚群抗体的阳性率(24.64%,68/276)远远高于J亚群抗体的3.62%(10/276)。本课题第二部分研究是在前面流行病学调查的基础上,无菌采集ELISA检测时p27抗原呈阳性的鸡的血浆进行ALV的分离与鉴定。血浆接种DF-1细胞并盲传两代,检测细胞培养上清中的p27抗原,呈阳性者利用ALV外源性病毒特异性引物进行PCR鉴定,呈阳性者再扩增其囊膜蛋白基因env和完成序列测定,并对其进行同源性分析并绘制系统进行化树。结果显示,获得的分离株GX-F3与两株ALV-B参考株的gp85基因氨基酸的同源性最高,分别为92.2%和92.8%,且它们处在系统进化树的同一分支上,证实获得的GX-F3属于ALV-B亚群病毒。本课题研究的结果表明,龙胜凤鸡的种群已存在外源性ALV的感染,而且呈现A/B亚群和J亚群的混合感染、以A/B亚群为主的流行特征。从中成功分离到了一株ALV-B亚群毒株GX-F3。研究结果为下一步开展龙胜凤鸡的净化提供了有用的依据。
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