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本文调查了实验室保藏的木霉菌株的植酸酶活性。136个供试菌株均能在植酸钙培养基平板上产生透明水解圈,初步表明木霉普遍具有植酸酶活性。基于透明圈半径显著大于菌落半径(半径之差≥0.3cm),筛选到36株植酸酶活性较高的菌株。课题组对这些菌株进行了植酸酶基因的克隆,得到的多个片段序列具有组氨酸酸性磷酸酶的活性部位保守基元。这些结果都表明木霉具有植酸酶活性,产植酸酶是木霉的普遍属性。对初筛的植酸酶活性较高的30个菌株进行了发酵产酶研究。借鉴文献和自行设计了9种产酶培养基,包括7种液体培养基和2种固体培养基。采用国标钼钒酸铵分光光度法测定发酵粗酶液植酸酶活性,但测定结果数值均很小且不稳定。因此,选择透明圈最显著的T1-1菌株,对木霉产植酸酶的能力及其测定方法进行了研究。基于木霉能使液体植酸钙培养基中原本非水溶性的植酸钙大约两天就“消失”的现象,测定方法的设计策略为以植酸的降解量作为木霉植酸酶的活性指标,代替国标法中以无机磷释放量作为酶活指标的策略。分别使用氯化铁-磺基水杨酸法、高效液相色谱-蒸发光散射法、高效液相色谱-紫外光谱法和液相色谱-质谱联用法四种方法,对木霉产植酸酶降解植酸的能力进行了测定。结果表明,氯化铁-磺基水杨酸法能够准确测定植酸的含量变化,实验操作简便,测定结果可靠;高效液相色谱-蒸发光散射法测定的数值与实际不符,方法不合适;高效液相色谱-紫外光谱法由于植酸只存在190-400nm波长末端吸收现象,不能定量植酸;液相色谱-质谱联用法由于植酸结构对称,表面电势低不能电离,所以不能测定准分子离子峰,以致无法分析。由此认为,氯化铁-磺基水杨酸法能够准确地定量木霉降解植酸的能力,可以作为木霉植酸酶活性的测定方法。以植酸降解量为酶活指标,定义植酸减少量1μg/(h·ml)为一个酶活单位U,测得T1-1菌株在植酸钙液体培养基中培养6天的平均酶活为15U/ml,其粗酶液在37℃、pH 3.0的最适反应条件下的酶活为50 U/ml。最后对植酸酶活性较高且菌落特征差异显著的45个菌株进行了分子鉴定,结果显示这些菌株属于木霉属的14个种,进一步表明木霉属的不同菌种普遍具有产植酸酶的能力。