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目的:通过研究RSV诱导的树突细胞自噬对哮喘小鼠炎性细胞因子的影响,以期揭示“伏痰”形成机理,从而科学阐释“伏痰”形成的理论。从干预病毒诱导DC自噬对哮喘小鼠炎性细胞因子的影响,探讨五虎汤对哮喘“伏痰”形成过程产生影响的可能途径,为进一步阐明五虎汤防治本病的作用机理提供理论与实验依据。方法:SPF级Bal B/C小鼠160只,按随机数字表法选取30只作为空白组,其余130只作为模型组,模型组按照RSV联合OVA致敏激发方法建立哮喘模型,于致敏14日后,从空白组及模型组各随机选取10只通过观察小鼠行为学及检测气道高反应性判断造模是否成功。将造模成功后的小鼠按随机数字表法分为6组,每组20只,即模型组、阳性对照组(地塞米松)、雷帕霉素组(自噬诱导剂)、五虎汤低剂量组、五虎汤中剂量组及五虎汤高剂量组。除空白组20只外,其余6组小鼠按分组情况分别予以药物干预:五虎汤低、中、高剂量组分别灌胃五虎汤(按临床量效关系观察结果拟定低剂量5ml/kg,中剂量10ml/kg,高剂量20ml/kg),并腹腔注射生理盐水(10ml/kg);阳性对照组腹腔注射地塞米松(1.82mg/kg),并灌胃等容积生理盐水;雷帕霉素组腹腔注射雷帕霉素(1mg/kg),并灌胃等容积生理盐水;空白组及模型组灌胃并腹腔注射等容积生理盐水。连续14日后取血及肺组织,采用透射电镜进行肺组织自噬体检查,Western Blot法检测自噬标志蛋白LC3 1、LC3 2及Beclin 1蛋白表达情况,并计算LC3 2/LC3 1比值;用ELISA法测定血清中IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-13水平,并计算IFN-γ/IL-4比值。结果:(1)五虎汤各剂量组及地塞米松组见小鼠易激惹、搔鼻、点头样呼吸等临床表现,经治疗后均有不同程度改善,其中以五虎汤中剂量组改善最为明显。(2)模型组小鼠气道阻力在乙酰胆碱浓度6.25mg/ml、12.5mg/ml、25mg/ml、50mg/ml下均较空白组升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。(3)LC3 2/LC3 1比值和Beclin1值:模型组较空白组升高,差异有统计学意义(P<0.05);五虎汤三个剂量组均较模型组升高,差异有统计学意义(P<0.05);雷帕霉素组LC3 2/LC3 1比值分别与五虎汤各组及模型组相比均有统计学差异,且雷帕霉素组LC3 2/LC3 1比值最高;地塞米松组LC3 2/LC3 1比值与模型组相比无明显统计学差异(P>0.05)。(4)IFN-γ水平:模型组较空白组降低,差异有统计学意义(P<0.05);五虎汤三个剂量组分别与模型组比较均升高,差异有统计学意义(P<0.05),且五虎汤中剂量组较五虎汤高剂量组、五虎汤低剂量组升高更显著;地塞米松组与五虎汤中剂量组、五虎汤低剂量组相比有统计学差异(P<0.05),且介于二者之间。(5)IL-4水平:模型组较五虎汤三个剂量组、地塞米松组、空白组均有升高,差异有统计学意义(P<0.05);五虎汤三个剂量组较空白组稍升高,差异有统计学意义(P<0.05),其中五虎汤低剂量组升高最显著,五虎汤高剂量组次之;五虎汤中剂量组与地塞米松组相比无明显统计学差异(P>0.05)。(6)IFN-γ/IL-4比值:空白组与五虎汤中剂量组、地塞米松组相比无统计学差异(P>0.05);五虎汤三个剂量组、地塞米松组均较模型组升高,差异有统计学意义(P<0.05),其中五虎汤中剂量组升高最显著。(7)IL-10水平:模型组较其他各组降低,差异均有统计学意义(P<0.05);五虎汤中剂量组与五虎汤低剂量组、五虎汤高剂量组相比,均有统计学差异(P<0.05),且五虎汤中剂量组升高最显著。(8)IL-13水平:模型组与其他六组两两相比均升高,差异有统计学意义(P<0.05),且模型组升高最显著;五虎汤中剂量组与五虎汤低剂量组、五虎汤高剂量组、地塞米松组、雷帕霉素组相比均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.RSV可诱导哮喘小鼠肺组织树突细胞自噬水平升高,可升高IL-4、IL-13水平,降低IFN-γ、IL-10水平,介导慢性气道炎症。2.五虎汤可降低哮喘小鼠血清IL-4、IL-13水平,升高IFN-γ、IL-10水平,改善气道炎症,发挥哮喘治疗作用,其中五虎汤中剂量组效果最佳。3.五虎汤能改善哮喘小鼠临床症状和气道炎症,同时能够提升RSV感染后的肺组织树突细胞自噬水平,但五虎汤是否直接通过提升树突细胞自噬水平影响哮喘小鼠炎性细胞因子分泌有待进一步研究。