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双酚A（bisphenol A,BPA）是一种广泛存在的类雌激素内分泌干扰物（EDCs）,它是在生产和生活中应用最为广泛的一类塑料制品。由于其大量的使用和不易降解的特性,对人类的生存环境和健康造成了威胁从而引起了人们的广泛关注。氧化应激和免疫应答是生态毒理学的重要研究内容。研究表明BPA暴露后能够诱导鱼类产生氧化应激和免疫应答反应,然而关于这两者间的作用机制还不是很清楚。为了探究BPA暴露后鱼体产生的氧化应激和免疫应答间的作用机制,本研究中将稀有鮈鲫幼鱼（3周龄）暴露于对照组和3个浓度（1、225和1000μg/L）的BPA组7天。利用了分光光度计法检测了对照组和处理组中H2O2和NO的含量并用实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）的方法检测了iNOS基因、TLRs通路相关基因以及细胞因子相关基因的mRNA表达量。近年来,研究发现细胞因子可以影响雄性的生殖功能并可能损害精子发生过程,主要集中在细胞因子对血睾屏障（blood-testis barrier,BTB）完整性的调控。在鱼类中也存在着类似哺乳动物BTB的结构,称其为支持细胞（Sertoli cells,SCs）屏障。然而,关于BPA暴露后鱼体内细胞因子的改变如何影响精巢功能的分子机制的研究还比较少。为了探究BPA暴露后细胞因子的改变对稀有鮈鲫精巢的损伤作用,本研究将稀有鮈鲫雄鱼（6月龄）暴露于15μg/L的BPA溶液7天、21天和35天后,通过组织切片和免疫组化方法分析其性腺组织学和SCs屏障的完整性。同时,采用qRT-PCR和Western blotting的方法检测了TNFα的mRNA水平和蛋白水平、SCs屏障相关蛋白（occludin和β-catenin）的mRNA和蛋白水平以及有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路基因p38 MAPK的mRNA水平的表达。本研究获得的主要结果如下:1、在1、225和1000μg/L BPA暴露7天后,发现幼鱼中H2O2浓度在三个处理组中均显著上升,呈浓度依赖性。NO的含量在225μg/L BPA组中显著升高而在1000μg/L的BPA组中显著降低了,iNOS基因的表达量仅在225μg/L BPA处理组显著升高。这个结果表明BPA暴露后诱导了稀有鮈鲫幼鱼体内氧化应激的产生。在225和1000μg/L BPA暴露组中IFNγ、CXCR3和CXCR5的mRNA表达均被显著抑制,说明BPA暴露后可能产生了免疫抑制效应并参与了T淋巴细胞的功能调节。TLR4、MyD88、TRAF6以及NF-κB的mRNA表达量在225和1000μg/L BPA组处理7天后均发生了显著降低,并且此通路相关的下游信号分子TNFα、IL-1β以及IL-8基因表达在不同浓度BPA暴露下均受到了显著抑制。这个结果表明在转录水平上TLRs信号通路可能参与了BPA诱导稀有鮈鲫幼鱼体内炎症反应的过程,并最终表现为免疫抑制的效应。2、15μg/L BPA暴露7天后雄鱼精巢中出现了血管充血、炎症细胞浸润的现象并检测到TNFα的蛋白水平显著增加了。这表明BPA短期暴露时鱼体对药物较为敏感,可以快速引起鱼体产生免疫应答并改变细胞因子的表达。occludin和β-catenin蛋白是构成SCs屏障的两种重要蛋白。BPA暴露7天和21天后显著降低了occludin和β-catenin的蛋白水平,并且免疫染色结果显示BPA暴露7天精巢中occludin蛋白出现散乱分布现象。这个结果表明BPA暴露破坏了SCs屏障连接蛋白的完整性。此外,BPA暴露7天后检测到SCs屏障的渗透性也发生了改变,生物素渗透进入了成熟的精子细胞中,精巢中布满了特异性染色。以上结果均说明BPA暴露后破坏了稀有鮈鲫精巢中SCs屏障的完整性。p38 MAPK在细胞因子调节BTB功能的过程中具有重要作用。p38 MAPK mRNA表达量在BPA暴露7天后显著降低了,而暴露35天后显著上升。这表明MAPK信号通路可能参与了BPA暴露后产生的TNFα对SCs屏障的损伤过程。综上所述,本研究通过检测组织形态学、关键基因的mRNA表达和蛋白水平,研究了BPA诱导下稀有鮈鲫体内氧化应激和对精巢的损伤作用,为后续BPA的研究工作垫定了基础。