【摘 要】
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目的原代培养新生大鼠视网膜神经细胞,建立高糖模型后,探讨左卡尼汀对高糖条件下视网膜神经细胞保护作用。方法取出生后1-3d SD)大鼠视网膜,0.25%胰蛋白酶消化制成不同大小细
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目的原代培养新生大鼠视网膜神经细胞,建立高糖模型后,探讨左卡尼汀对高糖条件下视网膜神经细胞保护作用。方法取出生后1-3d SD)大鼠视网膜,0.25%胰蛋白酶消化制成不同大小细胞团的悬液,接种于包有多聚赖氨酸的培养瓶中培养,用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,取义7-9天细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫荧光鉴定。取8-10天的细胞进行试验,实验设计为5组：正常细胞培养组(对照组)、高糖模型组、高糖模型组+左卡尼汀(50μmol/L)、高糖模型组+左卡尼汀(100μmol/L)、高糖模型组+左卡尼汀(200μmol/L),用MTT法检测细胞OD值来反映视网膜神经细胞活性,以电子自旋共振法(ESR)检测各组一氧化氮(N0)及活性氧(ROS)的释放来反映氧化应激程度。结果免疫荧光显示,培养的细胞大部分抗神经元特异性烯醇化酶抗体反应阳性。MTT结果显示高糖模型细胞活性显著降低(P＜0.05),左卡尼汀浓度200μmol/L,作用时间48h时对视网膜的保护作用最好。浓度200μmol/L时,对神经细胞产生毒性作用。ESR检测结果示高糖使细胞生成NO、ROS增多(p＜0.01),左卡尼汀能明显抑制NO、ROS的生成。结论高糖条件下视网膜神经细胞NO、ROS生成增多；左卡尼汀能抑制高糖条件下视网膜神经细胞氧化应激反应。
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