肝细胞癌TACE治疗前后血浆中游离DNA甲基化分析及其临床预后价值

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目的通过分析肝癌患者行肝动脉栓塞化疗(Transcatheter ArterialChemoembolization, TACE)前以及后续随访时的血浆DNA肝癌特异性甲基化异化基因的甲基化状态,为临床上预测和判断肝癌患者行TACE的疗效和预后提供一种简单有效的检测手段。方法应用甲基化特异性定量PCR技术(qPCR),筛选出接受TACE治疗的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者血浆中发生甲基化的靶点基因。且对收集的HCC患者接受TACE治疗过程中血浆标本进行靶点基因的DNA甲基化分析,并将其与患者的疗效及预后结果进行统计学分析。结果30例接受TACE治疗的HCC患者血浆标本中,HOXB13及GRHL2基因发生了明显的甲基化。将HCC患者血浆中HOXB13和GRHL2甲基化水平与肝良性疾病及健康人作比较,HCC患者血浆中HOXB13和GRHL2甲基化水平比肝良性疾病(Benign)组及健康(Normal)组甲基化水平高(p<0.05),而肝良性疾病组与健康组血浆中HOXB13和GRHL2甲基化水平结果无统计学差异(p=0.201)。后期研究的60例患者HOXB13和GRHL2甲基化水平随着治疗的进行,总体呈下降趋势(至随访节点结束,HOXB13甲基化水平为F=0.042±0.035,GRHL2甲基化水平为F=0.060±0.049)。在4种疗效结果中,HOXB13、GRHL2甲基化水平均有差异(p<0.05)。最后,对所收集的60例TACE治疗患者进行了五年随访,以本研究筛选的靶点基因术前甲基化水平的中位值(Median)为诊断预后临界点(HOXB13Median=0.19; GRHL2Median=0.13),并对所有患者随访结果进行生存分析,结果表明接受TACE治疗的患者术前血浆中HOXB13及GRHL2的甲基化水平与总体生存率(Overall Survival Rate)相关。结论HCC患者接受TACE治疗前后血浆中HOXB13和GRHL2基因发生了明显的甲基化,且患者的疗效及预后结果与患者术前血浆中的HOXB13和GRHL2基因甲基化水平相关,这两个靶点基因的甲基化状态可能对临床上预测和判断肝癌患者行TACE的疗效和预后具有重要的意义。
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