IL-8对微小凹结构中SH-SY5Y细胞VGCC功能响应的影响

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通过构建聚乳酸(PLLA)准三维微小凹结构研究SH-SY5Y细胞电压依赖钙通道(VGCCs)的响应情况。SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞与微小凹结构复合后,细胞在结构上呈现三种不同的生长行为特点:二维(2D)生长方式;三维(3D)生长方式和近似二维(N2D)的生长方式,分别生长在结构的表面,结构的侧壁以及结构底部。我们研究了微小凹结构是否有利于细胞呈三维生长以及不同生长类型在微小凹结构中的比例。白光图片下对细胞的铺展程度进行了分析。同时以荧光染料钙绿-1和激光共聚焦显微技术评价SH-SY5Y细胞分化前后VGCC功能响应性。进而用ELISA方法研究了平面基底和微小凹结构中白细胞介素8(IL-8)的分泌情况,同时评价了外源性IL-8对细胞VGCC功能响应的影响。实验结果显示微小凹中的细胞(N2D和3D)与平面基底上的2D细胞相比形态上更趋于圆形且铺展面积也减少。当用50mM的高钾刺激时,微小凹中的细胞在阳性细胞比例和VGCC反应幅度上都低于平面基底上的细胞。而且无论是铺展面积还是VGCC反应幅度,N2D细胞的数值都介于2D细胞和3D细胞之间,这表明细胞形态和VGCC功能响应之间相关联。而IL-8在微小凹结构中的分泌量高于平面基底上的分泌水平。以梯度浓度的外源性IL-8作用于SH-SY5Y细胞发现,高浓度的IL-8明显降低了细胞VGCC的响应性。所有结果表明微小凹结构构型以及细胞的生长行为特点都影响着细胞VGCC功能的响应,而且IL-8对SH-SY5Y细胞在微小凹结构中功能完善扮演了重要的角色。同时本研究也为以细胞为基础的实验系统中细胞功能的构建提供了新的方法。
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