双齿围沙蚕消化道降油细菌的分离鉴定及菌群多样性分析

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wusuowei2100
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
双齿围沙蚕(Pernereis aibuhitensis)隶属于环节动物门、多毛纲,是重要的海洋沉积食性无脊椎动物,其迁徙距离短,在我国河口沉积物和沿海滩涂有着广泛的地理分布。双齿围沙蚕能够蓄积大量环境中的有机污染物并通过自身的生物转化作用代谢和分解污染物,沙蚕也可以改善养殖水体底质,减轻和修复环境污染,是海洋沉积环境早期污染生态风险评价的指示生物和生态毒理学研究中重要的模式生物。本研究通过微生物分离培养的方法定向筛选出双齿围沙蚕消化道共栖石油降解菌,并通过DGGE的方法分析了所分离石油降解菌在双齿围沙蚕消化道的分布情况及其肠道共栖菌群多样性。实验将采自辽宁盘锦地区的双齿围沙蚕置于实验室无菌海水暂养24h后,将提取的沙蚕消化道样品匀浆后稀释用平板法涂布于2216E固体平板培养基,25℃培养24-48小时,根据不同菌落形态挑取单菌落进行纯化,共分离获得7株不同菌落形态的菌株,其中3株菌可在以柴油为唯一碳源的平板培养基中生长,编号分别为SC11-1、SC11-2、SC11-3,同样条件下SC11-3菌株生长状态最好,作为实验菌株。通过形态学、生理生化特性以及16SrDNA序列比对的方法对该菌株进行鉴定并测定其生长特性;同时测定添加不同葡萄糖浓度该菌株对柴油的降解性能;为进一步揭示以双齿围沙蚕为代表的多毛类消化道微生物菌群结构和分布相关生物学特征,阐明海洋底栖动物对持久性有机污染物的生物利用性和耐受性机理,实验分别从5条双齿围沙蚕消化道提取微生物基因组总DNA,通过细菌16SrDNA通用引物341F/534R进行了细菌V3高变异区的PCR扩增,再将PCR产物(约230bp)进行变性梯度凝胶电泳(DGGE),从而获得双齿围沙蚕消化道共栖细菌群落特征的DGGE条带;分别对DGGE图谱中公共条带的序列进行测序比对,分析其消化道的细菌多样性特征。结果显示:菌株SC11-3经过在25℃振荡培养(150rpm/min)15天后,对柴油的原始降解率约为40%;SC11-3菌株为革兰氏阴性菌、杆状,生理生化特征与游海假交替单胞菌(Peudoalteromonas haloplanktis)相符,16SrDNA同源性为100%;SC11-3菌株最适生长温度和pH分别为25℃和pH8,适宜NaCl浓度在1-3%之间;添加不同浓度的葡萄糖后,其降解效率有显著提高,葡萄糖添加量达到4g/L时,可降解柴油50mg以上,继续增加葡萄糖浓度,对降解率有抑制作用;通过对指纹图谱的半定量分析发现,双齿围沙蚕消化道共栖细菌菌群多样性丰富,优势条带明显,不同双齿围沙蚕个体间既存在着共同的细菌种属,也有各自特异的种属,DGGE图谱分析结果显示5条沙蚕肠道样品扩增条带数分别为22、21、18、18、19,其中样品间存在共同的优势条带,但优势条带含量存在个体间的差异;公共条带测序有下列十种细菌:假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.)未培养假交替单胞菌(Uncultured Pseudoalteromonas sp.),伊丽莎白菌属(Elizabethkingiasp.),产丙酸菌属(Uncultured Propionigenium sp.),未培养细菌(Unculturedbacterium),杆菌属(Bacterium),未培养假交替单胞(Uncultured Pseudoalteromonassp.),交替单胞菌科(Alteromonadaceae bacterium),未培养γ-变形菌纲(Unculturedγ-proteobacterium),假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.),其中产丙酸菌属(Propionigenium sp.)和假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.)分别为5条双齿围沙蚕肠道样品中的优势菌。
其他文献
基于当前连续退火钢卷调度问题生产与能源耦合的现状,针对考虑能耗的连续退火钢卷调度问题进行了研究。建立了以最小化能源和生产切换费用之和为目标,同时决策加热炉的加热温
铁山垅钨矿在抓好生产经营的同时,按照"守住两个山头,确保五平方公里稳定"的原则,坚持不懈抓好以护矿为主要内容的社会治安、矿业秩序整治工作,取得明显成效。近几年来,矿区
1990年12月5日至8日,中国钨业协会冶炼分会年会在广州召开,这是1989年冶炼分会换届以来召集的第一次会议。参加会议的有来自全国35个单位的55位代表,中国钨业协会的领导和同
<正>~~
确定城市夜景亮度与了解建筑饰面材料光反射特性对夜景节能意义重大。城市夜景按功率密度值8.9 w/m2能耗,计算出亮度值每提高1cd/m2耗电能0.84w。城市区域亮度提高1~2 cd/m2,其
大肠杆菌属Nissle 1917(EcN)是一种非致病性大肠杆菌,是非乳酸益生菌中研究最多的益生菌,血清型为O6:K5:H1,具有独特的基因组、半粗O6-脂多糖(LPS)表型、K5型荚膜、3种不同的
文章首先分析了高校寝室学风的现状和高校寝室学风现状的成因, 最后探索了以寝室为阵地的高校学风建设的新路径, 包括建立领导干部联系寝室制度; 建立强有力的寝室学风建设队
图像式DNA芯片扫描仪是生物医药研究中快速崛起的一项检测技术,相比于激光共聚焦方式,它具有简单高效的优点,可广泛应用于基因构造探索、新药研发、疾病治疗等领域。国内关于
经贸部最近公布,以下商品国内不得搞来料加工装配业务:两纱两布;漂布;阿拉伯袍裤;蚕丝类;抽纱;珍珠;免毛纯毛地毯;盐毛蘑菇和蘑菇罐头;皮制劳保手套;钨制品;氧化锑含氧化乙烯