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石蜘蛛Pinellia integrifolia N.E.Brown为中国特有的多年生草本植物,在自然环境下不生长珠芽。本论文以石蜘蛛的块茎、叶柄、叶片为材料来建立其再生体系,通过克隆半夏的PteMFT来构建表达载体p1301-PteMFT,并以再生体系产生的无菌植株为材料来建立转基因体系,主要研究结果如下:1、石蜘蛛高效再生体系建立以块茎、叶柄和叶片为外植体诱导愈伤组织,结果表明块茎为最佳愈伤组织诱导外植体,其次为叶柄、叶片;愈伤组织诱导与增殖培养的最佳培养基为MS+1.0 mg·L-1 6-BA+1.0 mg·L-11 2,4-D;芽分化与增殖的最佳培养基为MS+2.5mg/L6-BA+0.3 mg·L-11 IBA,在其培养基中进行培养时芽分化率达到最大分别为92%、92.30%、94.74%,芽增值倍数也达到最大值分别为12.80、8.85、10.71;三者产生的芽长势较好且健壮。最佳生根培养基为MS+0.5mg·L-1 IBA+0.5g·L-1活性炭,其生根率为100%,且主根8-15条,主根长可达10cm。繁殖周期由文献中的4个月缩短为2.5个月。2、p1301-PetMFT表达载体的构建成功克隆了半夏的PteMFT;将目的基因(PteMFT)插入到载体p1301中,构建了表达载体(p1301-PteMFT),并将其导入根癌农杆菌EHA105中,经PCR检测证明表达载体已导入农杆菌中。3、石蜘蛛遗传转化体系的建立以石蜘蛛块茎及叶柄为材料研究不同浓度Kan、Hyg对其愈伤组织的诱导率的影响,结果表明石蜘蛛的块茎和叶柄对Kan不敏感,随着Kan浓度的升高,块茎愈伤诱导率未出现降低的情况;而在kan浓度增加至500 mg·L-1,叶柄的愈伤诱导率降低至85.71%。块茎和叶柄对Hyg较敏感,当Hyg浓度为40 mg·L-1时,块茎和叶柄白化死亡,其愈伤诱导率为0%;而当Hyg浓度为20 mg·L-1时,叶柄和块茎的愈伤诱导率分别骤降至7.5%和6.67%;因此,后续筛选过程中选择Hyg浓度为20 mg·L-1作为抗压。对预培养时间、预培养时间、菌液OD600值、共培养时间及侵染时间对块茎与叶柄遗传转化影响进行研究,结果表明,适合石蜘蛛块茎遗传转化的最优条件为:块茎预培养6 d,且在OD600为0.8的菌液中侵染15min,共培养3 d;而叶柄的最佳遗传转化条件为:叶柄预培养2 d,且在OD600为0.8的菌液中侵染15min,共培养3d。本研究只进行了初步GUS染色的检测,并未得到转基因植株。