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研究目的： 通过研究大黄素改变活性氧水平来调控谷胱甘肽水平，对卵巢上皮性癌耐药的相关机制进行初步研究。 研究方法： 1、选择卵巢上皮性癌顺铂耐药株COC1/DDP细胞，进行细胞培养。 2、采用MTT法检测卵巢上皮性癌顺铂耐药株COC1/DDP细胞活力，用DDP（顺铂）、Emo（大黄素）、DDP+Emo（顺铂+大黄素）和DDP+Emo+NAC（顺铂+大黄素+乙酰-L-半胱氨酸），干预后用酶标仪于490 nm波长测定各孔光密度（OD）值，检测细胞的活力水平。 3、建立裸鼠成瘤实验模型，用DDP（顺铂）、Emo（大黄素）、DDP+Emo（顺铂+大黄素）和DDP+Emo+NAC（顺铂+大黄素+乙酰-L-半胱氨酸）对成瘤裸鼠进行腹腔化疗治疗，21天分组观察，记录比较瘤体大小，重量。 4、应用冰冻切片荧光染色法检测COC1/DDP细胞成瘤后组织层面活性氧水平。应用2,7-二氯二氢荧光法检测经过DDP（顺铂）、Emo（大黄素）、DDP+Emo（顺铂+大黄素）和DDP+Emo+NAC（顺铂+大黄素+乙酰-L-半胱氨酸）干预后的COC1/DDP细胞内活性氧水平。比较各组活性氧水平变化。 5、采用谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒实时检测不同药物干预后各组COC1/DDP细胞和各组成瘤裸鼠瘤瘤体组织的谷胱甘肽水平。 6、应用相关性分析，对细胞和瘤体组织的活性氧水平，谷胱甘肽水平进行关联比较。 研究结果： 1、在细胞活力检测中，DDP（顺铂）组可发挥约30%抑制作用，Emo(大黄素)组对肿瘤细胞活力几乎没有影响。DDP+Emo（顺铂+大黄素）组相对于单用DDP（顺铂）组抑制率有明显提高（P<0.05）并且增强作用可以被活性氧清除剂NAC（乙酰-L-半胱氨酸）减弱。 2、裸鼠成瘤分组后的成瘤体积、重量如下：DDP（顺铂）组的成瘤体积2046.70±43.08 mm3、重量2.20±0.59g，Emo（大黄素）组的成瘤体积2934.24±548.76 mm3、重量3.34±0.49g，DDP+Emo组的成瘤体积1595.60±406.73 mm3、重量1.34±0.30g，PBS（磷酸盐缓冲液）组的成瘤体积2803.79±162.50 mm3、重量3.36±0.12g，DDP+Emo（顺铂+大黄素）组体积和重量均小于各组，差异有统计学意义（P<0.05）； 3、（1）COC1/DDP细胞株在不同给药条件下分别暴露1小时。DDP+Emo（顺铂+大黄素）组的活性氧相对水平高于单用DDP（顺铂）组2.07倍，差异有统计学意义（P<0.05）。（2）使用活性氧清除剂NAC（乙酰-L-半胱氨酸）后的DDP+Emo（顺铂+大黄素）组即DDP+Emo+NAC组的活性氧水平相对值明显低于DDP+Emo（顺铂+大黄素）组，差异有统计学意义（P<0.05）。（3）不同瘤体组织冰冻病理切片，分析平均光密度，DDP+Emo（顺铂+大黄素）组较其他组的组织活性氧水平增高，与其他各组比较差异有统计学意义（P<0.05）。 4、（1）COC1/DDP细胞株在不同给药条件下分别暴露1小时。DDP+Emo（顺铂+大黄素）组的谷胱甘肽水平明显低于单用DDP（顺铂）组，差异有统计学意义（P<0.05），且能被活性氧清除剂NAC（乙酰-L-半胱氨酸）逆转。（2）Emo+DDP（顺铂+大黄素）组裸鼠瘤体的谷胱甘肽水平低于PBS（磷酸盐缓冲液）组及两种药物单用组，差异有统计学意义（P<0.05） 5、应用统计学关联性分析发现肿瘤模型瘤体组织中各组的谷胱甘肽水平与活性氧水平均成负相关。 研究结论： 1、大黄素联合顺铂药物应用干预卵巢上皮性癌顺铂耐药株COC1/DDP细胞比单独应用顺铂干预在体外更能明显抑制细胞株的活力。 2、卵巢上皮性癌顺铂耐药株裸鼠体内模型，大黄素联合顺铂药物应用明显抑制肿瘤体积、重量。提示大黄素联用顺铂可以增加对卵巢上皮性癌耐药肿瘤化疗的敏感性。 3、从细胞株和组织活性氧水平研究，同样发现大黄素联合顺铂相比单用顺铂对于人卵巢上皮性癌细胞COC1/DDP的生长有明显的抑制作用，从体外细胞到体内模型，均可以提高活性氧水平。 4、用荧光检测法检测谷胱甘肽，发现在细胞和组织学上，谷胱甘肽水平在大黄素联合顺铂药物干预相比单用顺铂药物干预对于人卵巢上皮性癌细胞COC1/DDP的有明显变化，谷胱甘肽水平下降趋势有显著变化。 5、研究发现活性氧水平与谷胱甘肽水平成负相关状态，活性氧水平上升诱导细胞凋亡，并可以降低谷胱甘肽水平，提高顺铂化疗敏感性。