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白血病是一类常见的造血系统恶性增生的克隆性疾病，对人类的健康构成了严峻的挑战。目前白血病的治疗仍然以化疗、骨髓移植为主。60%~80%的患者通过联合治疗能获得完全缓解，不幸的是大多数患者最终确因为复发而不治身亡。大量的研究表明，这是因为在白血病患者身体内主要存在着一群比例极少，具有自我更新增殖能力的细胞群－白血病干细胞（leukemia stem cells，LSCs）。研究表明，正是这群微小细胞群在白血病耐药和复发过程中起着主导的作用。因此，只有做到靶向清除LSCs才有望彻底从根源上治愈白血病。近些年来，大量研究数据表明，CD123，作为IL-3受体α链高表达于急性髓性白血病干细胞表面，而在造血干细胞表面几乎不表达，本课题基于以上特点，设计并构建了能够特异靶向急性髓性白血病干细胞的溶瘤腺病毒Ad.-sCAR-IL-3-TRAIL，Ad.-sCAR-IL-3-MnSOD，两个病毒都能靶向清除白血病干细胞，从而达到最终治愈白血病的目的。我们仍以腺病毒作为承载基因表达的载体，通过改变腺病毒与白血病干细胞亲和力，是我们的目的溶瘤腺病毒特异性的靶向于白血病干细胞。文章主要创新点在于：（1）通过遗传修饰改造使溶瘤腺病表达sCAR-IL-3融合蛋白（2）在腺病毒复制必需早期基因的E1A区上游，插入抗凋亡蛋白基因Survivin启动子，从而大大提高了溶瘤腺病毒的靶向性和安全性。（3）利用抑癌基因TRAIL/MnSOD，能有效抑制多种肿瘤细胞生长而且能诱导其凋亡，但是对正常细胞的生长，代谢影响很小或者几乎没有影响。我们主要的研究方法有：（1）我们将两个外源表达框（hCMV-sCAR-IL-3和hCMV-TRAIL，以及hCMV-sCAR-IL-3和hCMV-MnSOD，）插入到穿梭质粒中（2）用腺病毒骨架质粒pBGHE3与我们构建的穿梭质粒共转染HEK293，在293细胞中通过同源重组来实现目的溶瘤腺病毒的包装（3）抽提病毒基因组，利用PCR鉴定目的溶瘤腺病毒，并最终且在293细胞中大量扩增，利用CsCl梯度离心法纯化目的溶瘤腺病毒（4）通过体外实验，探究目的溶瘤腺病毒是如何诱导细胞凋亡的。体外实验结果表明，我们成功构建了可以特异靶向AML干细胞的溶瘤腺病毒Ad.-sCAR-IL-3-TRAIL，Ad.-sCAR-IL-3-MnSOD。实验表明，Ad.-sCAR-IL-3-TRAIL，Ad.-sCAR-IL-3-MnSOD不但能够有效地特异的靶向AML干细胞，而且能显著抑制AML干细胞增殖，诱导其凋亡，而且具有较高的安全性。