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烟草黑胫病是一种世界范围内普遍发生且危害严重的根茎类病害,严重影响到烟叶的产量及质量。为提高田间综合性状表现优良的钾高效烤烟品系对烟草黑胫病的抗病能力,实现优质钾高效烤烟品系的推广价值。本研究根据烟草黑胫病病原菌的生长特性,首先选择5种适宜黑胫病菌生长的常规培养基,结合烟草根系分泌物的诱导作用,选出致病力较强的黑胫病菌发酵液;然后将黑胫病菌发酵液纯化,获得活性较好的致病因子组分（即黑胫病菌无菌发酵液活性成分）;最后以致病因子为选择压,对田间表现综合性状优良的5种钾高效烤烟品系的花药进行抗黑胫病筛选。主要研究结果如下:1.诱导黑胫病菌致病力培养基的筛选。黑胫病菌在5种培养基（10%V8、胡萝卜、燕麦、烟汁、马铃薯）中暗培养,采用叶片离体注射法,观察所收集的5种黑胫病菌发酵液的叶片注射区变化。结果表明,马铃薯培养基（PDA）培养获得的无菌发酵液注射效果最明显,其烟叶的注射区在注射7d后出现明显的过敏性坏死反应（hypersensitive resistance,HR）,且黑胫病菌培养7d后取得的发酵液注射效果最好,因此选择马铃薯培养基（PDA）为诱导黑胫病菌强致病力的最适培养基。采用叶片离体注射法,判断烟草根系分泌物对黑胫病菌致病力的诱导作用。结果表明,A（未加根系分泌物的黑胫病菌发酵液注射反应）的病斑面积均值（0.56cm2）小于B（根系分泌物处理液的注射反应）的病斑面积均值（0.80cm2）,后者的HR反应更强烈,说明根系分泌物可能对黑胫病菌发酵液的致病力诱导具有促进作用。2.黑胫病菌发酵液的制备及粗分离。黑胫病菌发酵液过硅胶柱过滤,再经制备液相色谱进行粗制备,通过叶片离体注射法,判断黑胫病菌发酵液原液、超滤液、树脂水洗液和95%乙醇洗脱液的致病性强弱。结果显示,95%乙醇洗脱液的叶片注射区HR反应最明显,即致病性较强,而树脂水洗液的注射区无明显HR坏死斑反应,可弃掉此成分。将95%乙醇洗脱液旋转蒸发浓缩成干粉,再用ddH2O溶解备用。3.选择压的确定及抗黑胫病突变体的筛选。以95%乙醇处理液为致病因子选择压,选择5种钾高效品系烟株（GK2、GK8、HKDN-2、HKDN-8、HKDN-5）的花药进行离体培养。结果表明,5种钾高效烤烟品系的萌发率均不一致,且萌发率普遍较低,萌发率由高到低依次为GK2（38.0%）>HKDN-5（21.3%）>GK8（19.3%）>HKDN-8（15.3%）>HKDN-2（13.3%）。5种钾高效烤烟品系的花药萌发率均有随着黑胫病菌无菌发酵液浓度的增大而减小的趋势;钾高效烤烟品系GK2、GK8、HKDN-2、HKDN-8、HKDN-5最适选择压分别为3%、2%、3%、4%、2%。花培烟株经显微镜倍性鉴定和秋水仙碱加倍处理后,共诱导出烟苗235株,其中GK2品系44株,GK8品系61株,HKDN-2品系57株,HKDN-8品系39株,HKDN-5品系34株。采用叶片离体注射法,对筛选出的烟株进行黑胫病抗性鉴定。结果获得2株GK8高抗个体,中抗个体总计26株,其中GK2品系6株,GK8品系10株,HKDN-2品系6株,HKDN-8品系3株,HKDN-5品系1株。