论文部分内容阅读
生长分化因子9(GDF-9)基因是由卵母细胞分泌的一种生长因子，它对早期卵泡的生长和分化起着重要的作用。本研究分析了生长分化因子9基因的多态性，探索该候选基因与小尾寒羊高繁殖力之间的关系，为我国开展小尾寒羊高繁殖力的遗传学基础研究提供科学依据。 应用PCR—SSCP技术对两组样本进行生长分化因子9基因多态性分析。一组为130只有产羔记录的小尾寒羊血样；另一组为四个无产羔记录的绵羊品种血样(湖羊、小尾寒羊、萨福克羊和多赛特羊)。得到如下结果：在有产羔记录的小尾寒羊中，两对引物扩增片段出现两种基因型(AA和AB)。在湖羊和多赛特羊中，两对引物扩增片段均出现两种基因型(AA和AB)；在萨福克羊中，引物1扩增片段出现3种基因型(AA、AB和BB)，引物2扩增片段出现两种基因型(AA和AB)；而在无产羔记录的小尾寒羊中，没检测到突变基因型，并且两对引物扩增片段在四个不同绵羊品种间均达到极显著水平(P＜0.01)。经X~2适合性检验，四个绵羊品种扩增片段均处于Hardy-Weinberg平衡状态。 对引物1扩增片段的突变序列进行克隆和测序分析，结果表明，在外显子1的第152处碱基由A突变成G，将该基因的突变和正常核苷酸测序结果分别翻译成氨基酸序列，利用TFSEARCH ver 1.3软件进行同源性比较，发现突变碱基引起了氨基酸由N(天冬酰胺)突变为D(门冬氨酸)。蛋白质二级结构预测表明，氨基酸的突变引起了二级结构的改变，由旋管变成a-螺旋，并且该氨基酸下游有两个氨基酸二级结构发生变化，H、L也由旋管变成a一螺旋。 在有产羔记录的小尾寒羊中，各扩增片段与繁殖性状的最小二乘分析结果表明，引物1扩增片段对小尾寒羊第一胎产羔数的影响达到0.05显著水平，对第二胎产羔数的影响达到0.01显著水平;引物2扩增片段对小尾寒羊第一胎和第二胎产羔数的影响未达到显著水平。本研究中发现的引物1扩增片段多态性可能与繁殖性状有关，但还需进一步研究。