目的：慢性脑积水(Chronic hydrocephalus)是一种以脑脊液分泌过多或(和)循环、吸收障碍为主要特点的疾病，常继发于颅内出血和颅脑损伤。目前尚无有效的预防措施，治疗多选择脑脊液分流手术。但有时因为感染、堵管等并发症治疗失败，甚至导致病人死亡。因此如何防止脑出血后脑积水形成是学者们探讨的热点之一，近年来有大量研究表明颅内出血、颅脑损伤后在脑内的炎症反应介导细胞凋亡以及细胞外基质增生是慢性脑积水生成的主要途径。本实验拟通过建立大鼠脑室内不同血液成分注射模型，观察大鼠自体动脉全血、含血小板血浆、去血小板血浆脑室内注射后大鼠肌力、共济运动、脑室扩张程度、脑组织结缔组织生长因子(Connectivetissue growth factor, CTGF)的表达，了解不同血液成分及CTGF在大鼠慢性脑积水生成过程中的作用，为寻找针对性预防慢性脑积水的临床治疗方案提供可能。方法：Wistar大鼠60只，雌雄各半，清洁级，体重180-220g。所有大鼠于造模前进行网屏试验、平衡木试验、攀绳试验筛选剔除不合格鼠，剔除标准：网屏试验≥1；平衡木试验≥1；攀绳试验≥2。合格大鼠用电子称于造模前称重，并行网屏试验、平衡木试验、攀绳试验。除空白对照组不处理，所有大鼠均在实验当日10%水合氯醛腹腔注射麻醉，股动脉取抗凝血。所取血标本经离心分离得到含血小板血浆、去血小板血浆。自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组应用大鼠脑立体定向仪分别注入自体全血、含血小板血浆、去血小板血浆130μl，实验对照组注射等量生理盐水。于造模后第7、28日测量各组大鼠体重，并行网屏试验、平衡木试验、攀绳试验。各组大鼠于造模后第28日腹腔麻醉，灌注固定，取脑组织标本，测定大脑质量、容积、密度、侧脑室宽度后经固定、常规梯度脱水、浸蜡、包埋、切片。HE染色后光镜观察组织切片病理改变，免疫组化测定脑组织CTGF的表达并进行半定量分析。所有数据均采用SPSS for windows13.0软件包进行统计学处理。计量资料正态分布数据用均数±标准差(x±s)表示，各组间两两比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)或非参数检验(Nonparametric test)。方差分析前进行方差齐性检验，采用LSD法进行组间两两比较。相关性分析采用Pearson相关检验，P<0.05认为有统计学意义。结果：1各组大鼠一般情况的观察比较1.1一般状态的变化空白对照组大鼠进食好，精神好，被毛有光泽，活动灵活，未见明显异常状态，随着饲养时间的延长，体型渐长，体重不断增加。实验对照组大鼠麻醉清醒后表现为竖毛、精神萎靡、饮食摄水减少、活动减少，于术后第1日恢复正常，进食增多，精神状态佳，被毛光泽，活动灵活，无异常状态出现，随着饲养时间的延长，体型渐长，体重不断增加。各实验组大鼠麻醉清醒后表现为竖毛、精神萎靡、发抖，于术后3日内均精神萎靡、饮食摄水减少，活动减少，于术后4-5日渐恢复，精神较前好转，饮食摄水增加，但与空白对照组及实验对照组相比活动减少，反应较迟钝。随着饲养时间延长，体型有所增长，体重渐增加。1.2体重的比较(见Table1)造模前各组大鼠体重(g)分别为空白组198.00±5.94、实验对照组199.7±6.31、自体全血组199.5±6.17、含血小板血浆组199.40±5.25、去血小板血浆组198.40±4.97，各组间体重相比无统计学差异(P>0.05)。造模后第7日各组体重(g)为空白组207.60±3.59、实验对照组190.40±3.98、自体全血组194.50±7.19、含血小板血浆组191.50±5.04、去血小板血浆组189.50±3.98,实验对照组、自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组体重均明显低于空白对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。实验对照组、自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组之间无统计学差异(P>0.05)。造模后第28日各组体重(g)为空白组289.40±5.52、实验对照组288.80±7.59、自体全血组260.10±6.37、含血小板血浆组268.80±9.43、去血小板血浆组266.50±5.06。实验对照组体重低于空白组，但无统计学意义(P>0.05)；自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组体重低于空白组，有统计学意义(P<0.05)；自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组体重低于实验对照组，有统计学意义(P<0.05)；自体全血组体重低于含血小板血浆组、去血小板血浆组，有统计学意义(P<0.05)；去血小板血浆组体重低于含血小板血浆组，但无统计学意义(P>0.05)。2各组大鼠行为学比较2.1各组大鼠网屏试验比较(见Table2)各组大鼠行非参数性检验比较造模后28日网屏试验评分等级，各组RANK值为空白对照组17.50、实验对照组17.50、自体全血组44.60、含血小板血浆组30.40、去血小板血浆组17.50，空白组、实验对照组、去血小板血浆组评分等级相等，无统计学差异(P>0.05)，自体全血组、含血小板血浆组评分等级高于空白组、实验对照组、去血小板血浆组，有统计学意义(P<0.01)，单独分析自体全血组与含血小板血浆组RANK值为自体全血组14.60、含血小板血浆组6.40，自体全血组评分等级高于含血小板血浆组，有统计学意义(P<0.01)。2.2各组大鼠平衡木试验比较(见Table3)各组大鼠行非参数性检验比较造模后28日平衡木试验评分，各组RANK值为空白对照组16.50、实验对照组16.50、自体全血组41.30、含血小板血浆组36.70、去血小板血浆组16.50,空白组、实验对照组、去血小板血浆组评分等级相等，无统计学差异(P>0.05)，自体全血组、含血小板血浆组评分等级高于空白组、实验对照组、去血小板血浆组，有统计学意义(P<0.01)，单独分析自体全血组与含血小板血浆组RANK值为自体全血组11.30、含血小板血浆组9.70，自体全血组评分等级高于含血小板血浆组，但无统计学意义(P>0.05)。2.3各组大鼠攀绳试验比较(见Table4)各组大鼠行非参数性检验比较造模后28日攀绳试验评分，各组RANK值为空白对照组10.50、实验对照组10.50、自体全血组41.30、含血小板血浆组38.70、去血小板血浆组26.50,空白组、实验对照组评分等级相等，无统计学意义(P>0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组评分等级高于空白组、实验对照组，有统计学意义(P<0.01)；单独分析自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组RANK值为自体全血组21.30、含血小板血浆组18.70、去血小板血浆组6.50，自体全血组、含血小板血浆组评分等级高于去血小板血浆组，有统计学意义(P<0.01)；单独分析自体全血组、含血小板血浆组RANK值为自体全血组11.30、含血小板血浆组9.70，自体全血组评分等级高于含血小板血浆组，但无统计学意义(P>0.05)。3各组大鼠脑组织重量及密度比较(见Table5)各组大鼠脑组织质量(g)为空白组1.915±0.026、实验对照组1.902±0.028、自体全血组1.853±0.033、含血小板血浆组1.841±0.031、去血小板血浆组1.863±0.023，实验对照组脑组织质量低于空白组，但无统计学意义(P>0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组脑组织质量低于空白组，有统计学意义(P<0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组脑组织质量低于实验对照组，有统计学意义(P<0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组之间脑组织质量无统计学差异(P>0.05)。脑组织重量与体重的相关性：相关系数R=0.639(P<0.01)，脑组织质量与体重呈显著正相关。各组大鼠脑组织容积(ml)为空白组1.971±0.027、实验对照组1.953±0.029、自体全血组1.905±0.037、含血小板血浆组1.891±0.031、去血小板血浆组1.915±0.020，实验对照组脑组织容积低于空白组，但无统计学意义(P>0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组脑组织容积低于空白组，有统计学意义(P<0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组脑组织容积低于实验对照组，有统计学意义(P<0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组之间脑组织容积无统计学差异(P>0.05)。各组大鼠脑组织密度(g/ml)为空白组0.971±0.045、实验对照组0.974±0.066、自体全血组0.973±0.056、含血小板血浆组0.977±0.056、去血小板血浆组0.972±0.051，各组相比无统计学差异(P>0.05)。4各组大鼠侧脑室宽度比较(见Table6)各组大鼠侧脑室宽度(mm)为空白组0.511±0.058、实验对照组0.507±0.051、自体全血组1.200±0.045、含血小板血浆组1.053±0.031、去血小板血浆组0.589±0.106，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组脑室宽度均大于空白组，有统计学意义(P<0.05)，实验对照组小于空白组，但无统计学差异(P>0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组脑室宽度均大于实验对照组，有统计学意义(P<0.05)，自体全血组大于含血小板血浆组和去血小板血浆组，有统计学意义(P<0.05)，含血小板血浆组大于去血小板血浆组，有统计学意义(P<0.05)。5各组大鼠脑组织CTGF表达的比较(见Table7)各组大鼠脑组织CTGF阳性细胞百分比为空白组19.10±3.76、实验对照组20.00±4.03、自体全血组50.70±9.27、含血小板血浆组44.30±11.85、去血小板血浆组39.40±4.25，实验对照组阳性细胞百分比高于空白组，但无统计学意义(P>0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组阳性细胞百分比高于空白组，有统计学意义(P<0.01)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组阳性细胞百分比高于实验对照组，有统计学意义(P<0.01)，自体全血组阳性细胞百分比高于含血小板血浆组、含血小板血浆组阳性细胞百分比高于去血小板血浆组，但均无统计学意义(P>0.05)，自体全血组阳性细胞百分率高于去血小板血浆组，有统计学意义(P<0.05)。参照Soslow等[2]方法，对细胞显色强度进行分级0(阴性)1(弱阳性)2(阳性)3(强阳性)。各组大鼠间行非参数性检验比较细胞显色强度，各组RANK为空白对照组12.00、实验对照组12.00、自体全血组37.00、含血小板血浆组37.00、去血小板血浆组29.50，实验对照组细胞显色强度等级与空白组相同，无统计学差异(P>0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组细胞显色强度等级均明显高于空白组及实验对照组，有统计学差异(P<0.01)，单独分析自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组各组RANK为自体全血组17.00、含血小板血浆组17.00、去血小板血浆组12.50，自体全血组、含血小板血浆组细胞显色强度等级高于去血小板血浆组，有统计学意义(P<0.05)，自体全血组与含血小板血浆组细胞显色强度等级相等，无统计学差异(P>0.05)。参照Soslow等[2]方法对各组阳性细胞百分比进行分级(0-1%=0、1-10%=1、10-50%=2、50-80%=3、80-100%=4)并进行IHS评分(IHS=阳性细胞数等级×阳性细胞显色强度等级)。各组IHS评分进行非参数性检验各组RANK为空白对照组10.50、实验对照组10.50、自体全血组39.25、含血小板血浆组37.90、去血小板血浆组29.35，实验对照组与空白组IHS评分等级相等，无统计学差异(P>0.05)，自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组IHS评分明显高于空白组及实验对照组，有统计学意义(P<0.01)，单独分析自体全血组、含血小板血浆组、去血小板血浆组各组RANK为自体全血组19.25、含血小板血浆组17.90、去血小板血浆组9.35,自体全血组、含血小板血浆组IHS评分明显高于去血小板血浆组，有统计学意义(P<0.01)，单独分析自体全血组、含血小板血浆组RANK为自体全血组11.00、含血小板血浆组10.00，此二组相比无统计学差异(P>0.05)。结论：1在大鼠脑室中注入自体动脉全血、含血小板血浆、去血小板血浆均可造成脑室扩张，自体动脉全血、含血小板血浆组脑室扩张程度明显大于去血小板血浆组，有统计学意义（P<0.05），推测血小板在脑积水形成中可能起到一定作用。2在脑积水模型中脑组织中的CTGF表达上调，提示CTGF可能与慢性脑积水的发生相关。自体全血组、含血小板血浆组IHS评分明显高于去血小板血浆组，有统计学意义（P＜0.01）。也进一步说明血小板在脑积水中起作用。3大鼠慢性脑积水模型形成后的主要表现是四肢肌力下降和共济失调。