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目的：应用RNA干扰技术沉默肿瘤细胞中Raf-1基因，通过一系列分子生物学检验技术，分析肿瘤细胞生物学行为的变化，探讨Raf-1蛋白激酶在不同肿瘤细胞的生长、增殖、分化、凋亡中的作用及机制。 方法：(1)构建三种dsRNA载体pSIREN-shuttle-Raf-1a，b和c，将构建的载体经脂质体包裹转染人鼻咽癌细胞株HNE1，人喉癌细胞株Hep-2，人肺癌细胞株A549。(2)进行TUNER染色观察细胞凋亡，免疫组化染色观察Raf-1蛋白表达，检测转染细胞的细胞凋亡率和Raf-1蛋白的表达水平。(3)采用MTT法对转染后肿瘤细胞生长曲线进行描绘。(4)采用流式细胞术分析肿瘤细胞在转染后不同时间段细胞周期的改变。(5)采用流式细胞术检测转染后肿瘤细胞凋亡情况。(6)选择高感染效率载体，进而构建腺病毒载体Adeno-Raf-1b，包装并扩增(7)用Adeno-Raf-1b进行体外RNA干扰实验。 结果：(1)pSIREN-shuttle-Raf-1-b在3种肿瘤细胞转染中抑制Raf-1mRNA和Raf-1蛋白的表达效率较pSlREN-shuttle-Raf-1-a和pSIREN-shuttle-Raf-1-c增高。(2)免疫组织化学结果显示，Rag-1蛋白在pSIREN-shuttle-Raf-1b转染的肿瘤细胞中表达率下降，并且表达强度减弱。(3)细胞凋亡检测pSIREN-shuttle-Raf-1-b表现出较强的促凋亡作用。抑制了3种肿瘤细胞的增殖(P＜0.05)。(4)流式细胞术检测结果显示，pSIREN-shuRle-Raf-1-b可以阻止肿瘤细胞由G1期进入S期，转染