锌转运体Zip2在射血分数保留的心力衰竭心肌中表达变化

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目的:建立射血分数保留的心力衰竭(heart failure with preserved left ventricular ejection fraction,HFpEF)的大鼠模型;检测HFpEF时大鼠心肌组织内锌离子浓度以及锌转运体Zip2信使RNA(messenger RNA,mRNA)及蛋白的表达变化,探讨锌及Zip2在HFpEF中的作用。方法:使用达尔盐敏感性大鼠(Dahl salt-sensitive rat,DSS大鼠)制作HFpEF的动物模型,将DSS大鼠随机分为实验组和对照组,实验组使用氯化钠含量为8%的高盐饲料喂养,对照组喂养正常饲料(氯化钠含量0.3%),除氯化钠浓度不同外,其余饲料组份、浓度以及饲养条件均相同。监测大鼠的生命体征与精神状态等;每2周检测一次各组大鼠的无创血压和心率;分别在6、12及19周龄对大鼠进行心脏超声检查。获取建模成功的大鼠心脏标本,使用电感耦合等离子体发射光谱法(Induc-tively coupled plasma atomic emission spectrometry,ICPOES)测定实验组与对照组大鼠左心室心肌组织中锌离子浓度,实时荧光定量PCR(Real-time Quantitati-ve polymerase chain reaction,qPCR)及Western blot测定实验组与对照组大鼠的心肌细胞Zip2 mRNA及蛋白的表达。结果:至19周龄时,实验组大鼠出现毛发颜色灰暗、倦怠、活动度下降等表现;至19周龄时,实验组大鼠的收缩压与舒张压均明显升高,该组大鼠已发生高血压;19周龄时,实验组大鼠体重(body weight,BW)(g)低于对照组,心脏超声指标中室间隔舒张末期厚度(interventricular septum end-diastolic thickness,IVSd)、左室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic dimension,,LVDd)、左室后壁舒张末期厚度(left ventricular posterior wall end-diastolic thickness,LVPWd)、左室后壁收缩末期厚度(left ventricular posterior wall end-systolic thickness,LVPWs)、左心室质量(left ventricular mass,LVM)及LVM/BW明显高于对照组,说明实验组大鼠收缩功能正常,舒张功能损害,并出现左室肥厚表现,出现明显的HFpEF。测定实验组与对照组大鼠心肌锌离子浓度及Zip2 mRNA与蛋白的表达,发现实验组大鼠心肌组织中锌离子浓度与对照组相比升高128%,说明在HFpEF时,大鼠心肌组织中锌离子浓度升高。另外,实验组大鼠心肌细胞Zip2 mRNA表达与对照组相比下降40%,Zip2蛋白的表达与对照组相比下降50%。当HFpEF时,大鼠心肌组织中锌离子浓度升高,同时心肌细胞Zip2表达下降。结论:高盐饲养的DSS大鼠在19周龄左右即可达到HFpEF动物模型指标,此模型鼠可用作该疾病机制的研究。HFpEF时心肌组织中锌离子水平升高,Zip2mRNA及蛋白表达降低,以协助降低细胞内锌离子水平,维持机体锌稳态来保护心肌。
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