芩菊七藿合剂(BCNE)是由黄芩(Baicalin)、野菊花(Chrysanthemum)、三七(Notoginseng root)和淫羊藿(Epimedium)4味中草药中的主要有效成分黄酮(Flavonoids)组成的治疗鸭病毒性肝炎DVH(Duck virus hepatits)的合剂,根据农业部兽药管理规定,任何兽药产品需要有效、安全和质量可控。为此,对BCNE的安全性及质量控制进行了研究,主要包括:试验Ⅰ中药芩菊七藿合剂的安全性研究中药芩菊七藿合剂的安全性试验主要包括急性毒性试验(Acutetoxicity test)、长期毒性试验(Long-term toxicity test)和靶动物安全性试验(Target animal safety test)三个方面。急性毒性试验预实验无法测出BCNE的LD50(Lethal dose 50%),因此进行了最大给药量的试验(Maximun administration dosage test),测得BCNE的最大给药量为8000 mg/kg(净药量计算)。长期毒性试验根据最大给药量,取ICR小鼠,预饲一周,分高(H,40 mg/20g BW)、中(M,10mg/20gBW)、低(L,2.5mg/20gBW)三个剂量组和溶剂对照、空白对照5组,各组按剂量灌胃,SC组灌溶剂,BC组灌蒸馏水,并均按每20 g体重灌液体积1mL灌胃,每天1次,连续给药14 d。观察小鼠的精神、活动、采食、饮水、发病及死亡情况,至停药后第14d。分别于给药前(D0),停药后第1(D1)、7(D7)和14(D14)d,每组随机抽取6只(雌雄各半),眼球采血,测定其血常规、血液肝肾功能生化指标和脏器指数,并观察心、肝、脾、肺、肾组织病理变化。结果显示,给药后各小鼠的临床指征、精神状态均正常,血常规指数、血液生化指标均在正常值的范围内,各个脏器,未见明显的肉眼病理变化,肝肾切片也均未见异常。表明BCNE并没有明显的长期毒性反应。靶动物安全性试验,将120只雏鸭分为高、中、低三个剂量组和空白对照组,每组30只。高、中、低剂量组饮喂芩菊七藿合剂,分别是3 mg/羽、9 mg/羽、15 mg/羽,空白对照组饮水中添加等体积溶剂,每天1次,连续5 d。分别在给药前1d、停药后第1d、7 d,各组随机抽取5羽称重、采血,测定血清肝肾功能生化指标和脏器指数。结果给药后各组鸭的临床指征、精神状态及血液生化指标均正常。表明BCNE对靶动物雏鸭安全。试验Ⅱ中药芩菊七藿合剂有效成分的定性与定量分析为了控制中药芩菊七藿合剂(BCNE)的质量,研究了 BCNE中主要成分的含量测定方法和各组方药物的定性鉴别方法,主要包括总黄酮含量、淫羊藿苷和黄茶苷含量高效液相色谱法 HPLC(High-performance liquid chromatography)测定,以及淫羊藿、黄芩、三七、野菊花的薄层色谱TLC(Thin-layerchromatography)鉴别。总黄酮含量测定采用芦丁法测定,对测定波长、加样回收率、仪器精密度、重复性等进行优选考察,发现在波长510 nm时测定样品干扰小,测得3批样品中总黄酮的含量在7.496～7.781 mg/mL之间。淫羊藿苷和黄芩苷的定量分析,对高效液相色谱法测定淫羊藿苷和黄茶苷含量方法中流动相和柱温条件、进样量、样品处理等方法进行了优选,根据所确定的方法,测得3批样品中淫羊藿苷含量为0.283～0.290mg/mL,黄芩苷浓度为1.501～1.674mg/mL之间。淫羊藿、黄芩、三七、野菊花的薄层鉴别对淫羊藿、黄芩、三七、野菊花的薄层鉴别中的点样量、展开剂、展开温度、显色温度、显色剂等条件进行优选。采用最优条件,3批样品中主要有效成分均得以良好显色。试验Ⅲ中药芩菊七藿合剂稳定性的初步考核通过考察BCNE中各成分的性状、再分散性、沉降体积比、pH值、总黄酮含量、淫羊藿苷和黄芩苷含量等项目来确定BCNE中有效成分的稳定。采用光加速试验考察了在光照强度为4500lx ± 500lx的强光照射下的BCNE三批样品分别在0d、6 d、12 d时,上述各指标的变化。试验结果显示,BCNE复方中的主要成分淫羊藿苷和黄芩苷的含量在12 d内稍有降低,表明BCNE对光有敏感性,可以选择在弱光或是阴暗处保存。温、湿加速稳定性试验在37°C ±2℃、相对湿度为60%±5%的条件下处理了三批BCNE样品,观察各项指标,结果表明,BCNE在3个月内比较稳定,各种性状及淫羊藿苷和黄芩苷的成分没有发生变化,表明BCNE在3个月内能够保持稳定。