近年来维生素B₁₂越来越多地被医药工业、食品工业和畜牧业等关乎国计民生的行业所应用。腺苷钴胺素作为维生素B₁₂的主要存在形式之一,其作用也越来越受到重视。本论文从应用角度出发,对腺苷钴胺提取方法进行了以下几个方面的初步研究,期望为腺苷钴胺素生产工艺改进提供参考借鉴。1、建立了一种针对脱氮假单孢杆菌发酵液中有效成分分析的检测方法。羟基钴胺素、脱氧腺苷钴胺素、甲基钴胺素是发酵产生维生素B₁₂的有效形式。避光条件下,脱氮假单孢杆菌发酵液经细胞破碎后,使用高效液相色谱分析其中维生素B₁₂各有效成分含量。利用三种钴胺素易和氰化钠反应的原理,建立了一种适合生产应用的检测方法,该检测方法重复性好、分析速度快,可应用于工业生产的过程监控和检测。2、发酵液的处理方法研究。经过发酵液分析,发现菌体细胞内含有绝大部分腺苷钴胺。据此确定了工艺路线,并研究了不同絮凝剂对发酵液絮凝效果和过滤收率的影响,选择了合适的絮凝剂。通过对多种破壁方法的实验研究,确定了煮沸法为合适的方法,并利用膜分离设备对煮沸处理的菌体进行分离。得到了适合大孔树脂提纯的滤液。3、大孔树脂吸附法提取纯化滤液对四种大孔树脂提纯滤液的动力学进行了研究,并以此为根据进行了大孔树脂的选型,并对该树脂的具体操作条件进行了研究并确定了初步的工艺控制点。4、定性分析利用以往维生素B₁₂的生产经验,对提纯得到腺苷钴胺纯品进行了结构分析、质量分析和稳定性研究。最终确定经过多步骤地提取得到的腺苷钴胺符合要求,产品质量达到国家药典要求。