论文部分内容阅读
五味子为木兰科五味子属植物五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Baill.的干燥成熟果实。木脂素类成分是其作用于中枢神经系统的主要活性成分。本课题对五味子木脂素类化学成分及其抗阿尔茨海默症的体外、体内的药理活性进行了系统研究、对活性成分—五味子甲素的代谢和分布,以及五味子甲素对CYP3A4代谢药物多烯紫杉醇的药代动力学影响进行了初步研究。通过用乙酸乙酯闪式提取五味子果实,对得到的乙酸乙酯提取物利用硅胶柱色谱、Sephadax LH-20柱色谱、开放ODS柱色谱、制备薄层色谱(PTLC)及制备型反相HPLC柱色谱等手段进行分离,从中分到40个化合物。根据其理化性质以及波谱学方法鉴定了 34个化合物。分别为schisanchinin A (1),schisanchinin B (2), schisanchinin C (3), tigloylgomisin P (4),(-)-tigloyl-deangeloyl-gomisin F (5), gomisin F (6),gomisin G (7),五味子酯乙(gomisinB)(8),五味子酯丁(schisantherinD)(9),五味子甲素(deoxyschizandrin)(10),五味子乙素((±)-y-schizandrin) (11),五味子醇乙(gomisin A) (12),五味子醇甲(schizandrin) (13),前戈米辛(pre-gomisin) (14), gomisinN(15),五味子丙素(schizandrin C) (16), (±)-gomisin M1 (17),(-)-gomisin M1 (18),(-)-gomisin L1(19), (+)-gomisin M2 (20),gomisin J (21),(+)-gomisin k3 (22a),kadsulignan N (23),methylgomisin O (24), methylisogomisin O (25), 7(18)-dehydroschisandro A (26),epigomisin O (27a), gomisin O (27b),红花五味子酯(rubschisantherin) (28),gomisin D (29), gomisin E (30),邻苯二酸二丁酯(dibutylphthalate) (31),β-谷甾醇(β-sitosterol)(32),甘五酸(ganwuweizicacid)(33)。其中化合物 1-3 为新化合物,化合物23为首次从本属植物分离得到,化合物24, 25, 28为首次从该种植物中分离得到,化合物26为新天然产物。采用LPS刺激的BV2小胶质细胞异常活化模型,以小胶质细胞NO释放量为评价指标,测定了从五味子中分离得到的28种木脂素的抗小胶质细胞活化活性。结果表明:联苯S型木脂素好于R型。联苯环上连一个-OCH20-的木脂素活性好于连2个-OCH20-,S型木脂素类在2, 3位上连有-OCH20-的活性强于连在12, 13位的木脂素。木脂素八元环上取代基的活性为6-OCH3> 6-OAng > 6, 14位连接的复杂侧链> 6-OAc > 6-OBz > 6, 9位成环。采用侧脑室注射Aβ1-42致痴呆小鼠模型进行实验,通过行为学实验测试五味子醇甲、五味子甲素对小鼠学习记忆能力的影响。并对皮层和海马体的抗氧化活性进行测定,来探讨其作用机制。结果显示Y迷宫实验中灌胃给予36 mg/kg、12 mg/kg五味子醇甲及五味子甲素可显著改善小鼠工作记忆障碍。水迷宫实验中36 mg/kg五味子醇甲在第二、三天,36 mg/kg五味子甲素在第三天能显著改善小鼠的空间学习记忆。36mg/kg五味子醇甲及五味子甲素组可以提高脑中SOD和GSH-Px活性,减少MDA含量,增加脑中GSH含量并降低GGSG含量,12mg/kg五味子甲素组小鼠即可显著降低脑中MDA含量、增加GSH含量,提示其改善脑中氧化应激的作用好于五味子醇甲。作用于神经系统的药物首先必须能够透过血脑屏障,因此有我们对服用五味子甲素后在脑中的分布进行了初步研究,五味子甲素在体内的代谢成分研究未见报道,因此同时对五味子甲素的体内代谢过程进行了初步分析。结果显示五味子甲素在体内除了代谢为五味子醇甲外,代谢产物还有异五味子醇甲。灌胃和静脉给予五味子甲素都在大鼠脑内检测到五味子甲素和其代谢产物五味子醇甲,说明五味子甲素可以通过血脑屏障。五味子甲素还是CYP3A4酶的良好亲和剂,为了解同时服用五味子甲素对其它CYP3A4酶代谢药物的影响,考察了服用五味子甲素后是否影响多烯紫杉醇的代谢。结果显示预先灌胃服用五味子甲素后,灌胃,静注多烯紫杉醇,其AUC(0-t)、Cmax、F均小于单独给药,但MRT(0-t)却变大,表明联合用药后能延长多烯紫杉醇在体内的滞留时间,但不增大多烯紫杉醇的生物利用度。联合用药不显著影响多烯紫杉醇的代谢。以上研究为今后五味甲素的新药研发的药物-药物相互作用提供了依据。