阿魏酸钠对多囊卵巢大鼠颗粒细胞凋亡的影响

来源 :郧阳医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maryren
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目的:通过采用雄激素造模法皮下注射脱氢表雄酮建立多囊卵巢大鼠(PCO大鼠)模型,然后以PCO大鼠为研究对象,研究阿魏酸钠对PCO大鼠体重增幅、血清激素水平、卵巢颗粒细胞凋亡情况及卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响,探讨阿魏酸钠对PCO大鼠卵巢颗粒细胞的抗凋亡作用机制及对多囊卵巢大鼠的治疗效果。方法:40只23日龄SD清洁级雌性大鼠随机分成模型组和空白组,模型组采用雄激素造模法,每天皮下注射脱氢表雄酮6mg/100g体重+0.2ml注射用油剂,连续20天,建立多囊卵巢大鼠模型。造模完成后模型组随机抽取10只,通过血清激素水平和卵巢组织学多囊变来评价造模效果,造模成功率>80%时,将模型组剩余大鼠随机分成阿魏酸钠治疗组和对照组,各10只。阿魏酸钠治疗组每天给予阿魏酸钠200mg/kg腹腔注射,对照组和空白组则给予0.5ml生理盐水腹腔注射,连续4周。阿魏酸钠干预期间每天观察各组动物的体重变化情况;阿魏酸钠干预完成后腹主动脉采血放免法测血清激素水平的变化情况;摘取各组大鼠双侧卵巢,在解剖显微镜下去除卵巢组织表面脂肪,10%甲醛固定,石蜡包埋常规切片,腿染色镜检,TUNEL法观察各组卵巢颗粒细胞凋亡情况的差异,免疫组化法观察卵巢颗粒细胞Bcl-2和Bax蛋白表达水平的变化。结果:①动物体重变化:阿魏酸钠治疗组体重(75.010±6.985g)与对照组(90.467±9.035g)、空白组(60.300±9.056g)比较,治疗组动物体重增加幅度明显降低,统计学有显著性差异(P<0.001);②血清激素水平改变:血清T浓度阿魏酸钠治疗组(8.631±4.718ng/ml)与对照组(16.181±5.314ng/ml)、空白组(7.571±4.326ng/ml)比较显著性降低(P<0.001);血清E2浓度阿魏酸钠治疗组(11.685±6.158pg/ml)与对照组(15.551±7.632pg/ml)比较明显降低(P<0.05);血清P浓度阿魏酸钠治疗组(34.463±10.668ng/ml)与对照组(29.125±9.147ng/ml)比较明显升高(P<0.05),血清FSH浓度阿魏酸钠治疗组与对照组比较略升高,无明显差异;血清LH浓度阿魏酸钠治疗组与对照组比较略降低,无明显差异;③组织学检查:肉眼观察:阿魏酸钠治疗组和对照组卵巢体积增大,色稍白,表面光滑未见明显囊状扩张。光镜HE染色观察:对照组卵巢镜下可见多个囊状扩张的卵泡及闭锁卵泡,体腔明显增大,占据整个卵巢髓质,颗粒细胞层明显减少至2-3层,卵泡内卵母细胞或放射冠消失,卵泡膜层增厚,未见黄体形成。阿魏酸钠治疗组卵巢镜下可见多个囊状扩张的卵泡,但体腔较对照组明显缩小,颗粒细胞层数增加至4-6层,并可见少量黄体形成;④TUNEL检测:阿魏酸钠治疗组卵巢颗粒细胞凋亡率(29.155±1.194%)较对照组(41.326±10.69%)显著性降低(P<0.001);⑤免疫组化结果:阿魏酸钠治疗组卵巢颗粒细胞Bcl-2表达的OD值较对照组显著性地增高(P<0.001),Bax表达的OD值较对照组显著性地降低(P<0.001)。结论:阿魏酸钠能使多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白bcl-2表达明显升高,Bax表达明显降低,巢颗粒细胞凋亡率显著性降低;使多囊卵巢大鼠的卵巢颗粒细胞层数增加,黄体形成增加:使PCO大鼠的体重、血清T、E2激素水平明显下降;血清P激素水平明显升高。因此,我们推测阿魏酸钠改善多囊卵巢大鼠内分泌状况和降低体重增加幅度的作用可能与调节卵巢颗粒细胞上Bcl-2和Bax蛋白表达,影响两蛋白的比例关系,增加Bcl-2/Bax的比值,使Bax与Bcl-2蛋白形成异源二聚体,发挥其抗细胞凋亡的作用有关。
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