田七注射液对阿霉素肾纤维化大鼠的PDGF-BB/TGF-β1/Smads信号通路的影响

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:RSH1987
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目的:观察田七注射液对阿霉素(ADR)肾病大鼠肾脏血小板衍生生长因子(PDGF-BB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smads蛋白表达的影响,探讨田七注射液对ADR大鼠肾脏纤维化的作用机制。   方法:将清洁级(Sprasue-Dawley)SD雄性大鼠80只,随机分为四组:正常组、对照组、模型组、田七注射液治疗组(以下简称田七组),每组20只。除正常组外,其余三组均行右肾切除术,对照组术后不注射阿霉素,予生理盐水(1.5ml/100g·d)腹腔注射;模型组于术后第7天及术后第30天分别尾静脉注射阿霉素5mg/kg、3mg/kg建立阿霉紊肾纤维化犬鼠模型,造模后予生理盐水(1.5ml/100g·d)腹腔注射;田七组按上法造模后,予田七注射液(1.5ml/100g·d)腹腔注射给药,连续给药8周后,与其他三组同时处死。处死前收集腹主动脉血和肾脏组织标本。观察实验大鼠治疗前后的体重与一般状况;在给予田七注射液的第2、第4、第6和第8周后分别于各组设置代谢笼,留取24小时尿液。采用磺柳酸-硫酸钠比浊法检测24小时尿蛋白定量;采用全自动生化分析仪检测大鼠血清尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr),观察肾功能变化。取各组大鼠肾组织行苏木素伊红染色(HE)和马松染色(Masson),光镜下观察肾脏病理变化;采用免疫组化法检测肾组织中PDGF-BB、TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白表达水平。   结果:(1)各组大鼠一般情况:与对照组大鼠相比模型组大鼠活力明显减退、体重下降、畏寒、食欲差、舌质瘀紫、尾色瘀青,差异具有统计学意义(P<0.05)。田七组大鼠的进食量、活动度、灵敏度略优于模型组,恶寒怕冷现象不明显,舌质瘀紫、尾色瘀青程度有所改善,且体重下降速度较模型组慢。(2)各组大鼠24h尿蛋白定量结果:模型组及田七组肾纤维化大鼠24h尿蛋白定量均较对照组明显升高(P<0.01);与模型组比较,田七组24h尿蛋白定量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)各组大鼠生化检测结果:田七组和模型组大鼠的BUN、Scr均显著高于对照组(P<0.01);与模型组相比,田七组BUN、Scr有所降低(P<0.05)。(4)各组大鼠肾脏病理切片显示:与对照组相比,模型组的肾脏肿大,颜色变浅,有囊性感。肾脏剖面,模型组的肾脏实质明显变薄,呈囊状,颜色暗红,表面粗糙不平,有囊肿和瘢痕。缺血状,以肾皮质为重,光镜下肾小管上皮细胞扁平,细胞崩解、脱落,伴细胞再生;肾小管基膜增厚,管腔扩张,内可见细胞的崩解碎屑;肾间质可见淋巴-单核细胞浸润,伴细胞外基质(ECM)沉积;部分肾小球有新月体形成,部分肾小球出现局灶硬化;而田七组的肾脏病理改变明显轻于模型组;与模型组比较,田七组肾小球硬化指数及肾间质损伤分数明显下降(P<0.01)。(5)各组大鼠免疫组化法检测结果:与对照组比较,模型组PDGF-BB、TGF-β1、Smad3表达显著上调(P<0.01),Smad7表达显著下调(P<0.01);与模型组比较,田七注射液治疗组肾组织PDGF-BB、TGF-β1、Smad3表达显著下调(P<0.01),Smad7表达显著上调(P<0.01)。   结论:(1)田七注射液可以降低ADR肾纤维化大鼠的BUN、Scr,减少尿蛋白,改善肾脏病理损伤,对肾脏有保护作用。(2)田七注射液的作用机制可能是通过影响PDGF-BB蛋白的表达,下调TGF-β1、Smad3蛋白的表达,上调Smad7蛋白的表达,达到延缓肾纤维化进展的目的。
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