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随着养殖业的迅猛发展,动物源性食品的安全问题受到人们的普遍关注,其中尤以药物残留问题更为突出,是影响动物源性食品安全的主要因素。磺胺类药物(sulfonamides, SAs)是一种常用兽药,SAs的不合理使用,将会残留在食品动物的肝、肾、肌肉、脂肪及奶中。磺胺嘧啶(sulfadiazine, SD)的常规检测方法主要包括高效液相色谱法、色谱-质谱联用法等理化检测方法,以上检测方法需经过繁琐的样品前处理,效率较低、检测成本高,难以满足基层检测的实际需要。免疫学检测方法具有灵敏度高、方便快捷、成本低等特点,已被大量用于食品安全与检测中。本研究在制备SD全抗原的基础上,制备抗SD单克隆抗体(monoclonal antibodies, McAb);并利用该抗体建立SD的化学发光酶免疫检测方法(Chemiluminescent Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, CLEIA)。主要研究内容如下：(1)采用重氮法、戊二醛法制备SD免疫抗原与检测抗原,并免疫BALB/c小鼠,制备SD多克隆抗体。对两种方法制备的抗原进行鉴定,发现重氮法优于戊二醛法。重氮法制备的摩尔结合比分别为3.7：1、8.0：1、9.0：1三种免疫抗原中,又以结合比为8.0：1的抗原免疫效果最佳。(2)在成功制备SD多克隆抗体的基础上,采用杂交瘤技术,制备SD McAb。经细胞融合、阳性筛选、亚克隆,获得一株稳定分泌抗SD McAb的杂交瘤细胞,命名为1F6。通过体内诱生法制备了McAb腹水,间接酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)测定腹水效价为1：1.28×106,经类型鉴定,抗体亚类为IgG 2b,亲和常数5.5×109L/mol,与STZ交叉反应率为60.3%,与SP、SM2、SMD、SMM、SMZ、SQX、PABA、SN、SMT、p-ASA交叉反应率较低或未见交叉反应。(3)建立CLEIA法检测猪肉中SD残留。所建立的间接竞争CLEIA法的线性范围为6.4～219.8 ng/mL, IC50、LOD分别为37.6、5.1 ng/mL,加标回收率71.0-96.3%,批内变异系数在0.9-7.4%,批间变异系数在7.6-10.5%。用建立的CLEIA法对随机抽取的南昌市售猪肉样本进行SD含量测定,并与HPLC法进行比对验证,结果显示两种方法的相关系数R2=0.9386。